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真菌種屬鑒定 PCR Mix 6100 次保存

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  • 更新時間2017-07-18
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真菌種屬鑒定 PCR Mix 6100 次保存是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 6100 次保存 產(chǎn)品詳情

 

真菌種屬鑒定 PCR Mix 6100 次保存產(chǎn)品及特點:
易錯 PCRerror-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當?shù)倪x擇方法,則可從構(gòu)建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規(guī) PCR 的比較如下:本產(chǎn)品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發(fā),本產(chǎn)品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學(xué)研究領(lǐng)域顯示出了它的*性。
2. 配方經(jīng)過精心優(yōu)化,突變率穩(wěn)定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% ±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內(nèi)基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設(shè)計位點,則可使產(chǎn)物克隆到表達載體,也可以用于體內(nèi)蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續(xù)易錯 PCRsequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產(chǎn)物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產(chǎn)生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產(chǎn)物,對于 1kb 以上的產(chǎn)物,建議分段擴增。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 6100 次保存變性溫度與時間:
模板變性溫度是決定 PCR 反應(yīng)中雙鏈 DNA 解鏈的溫度,達不到變 性溫度就不會產(chǎn)生單鏈 DNA 模板,PCR 也就不會啟動。變性溫度低則變性不*, DNA 雙鏈會很快復(fù)性,因而減少產(chǎn)量。變性溫度太高,又會影響酶的活性。一般情況 下可設(shè)為 94 20~30 秒,高溫時間應(yīng)盡量縮短,以保持耐熱 DNA 聚合酶的活力, 高變性溫度不宜超過 95 退火溫度與時間:退火溫度決定 PCR 特異性與產(chǎn)量。溫度高特異性強,但過高則引物 不能與模板牢固結(jié)合.
真菌種屬鑒定 PCR Mix 6100 次保存DNA 擴增效率下降;
溫度低產(chǎn)量高,但過低可造成引物與模板 錯配,非特異性產(chǎn)物增加。合適的退火溫度一般在 45~68之間。設(shè)置特定反應(yīng)的 適退火溫度,可根據(jù)引物的(G+C%含量進行推測,一般實驗中退火溫度比擴增引 物的熔解溫度 Tm 5,退火時間一般為 30~60 秒,足以使引物與模板之間*結(jié) 合,長時間退火沒有必要。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 6100 次保存使用方法:
1. 30 uL 的標準 PCR 反應(yīng)體系為例,如果反應(yīng)體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL 1 -5 U 補水到 30 uL
2.
按已經(jīng)優(yōu)化的 PCR 條件進行一定循環(huán)數(shù)的 PCR(循環(huán)數(shù)與突變率的關(guān)系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優(yōu)化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94 3 分鐘易錯 PCR 94 1 分鐘 45 1 分鐘 循環(huán) 30 次(見注) 72 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結(jié)束后做延伸處理。
15R),19R-hydroxy Prostaglandin F1α 500 ug     9。alpha。,11。alpha。,15R,19R-tetrahydroxy-prost-13E-en-1-oic acid; 15R),19R-hydroxy PGF1α; 15R),19R-hydroxy Prostaglandin F1α

Lofexidine hydrochloride 1 g     2-[1-2,6-dichlorophenoxyethyl]-4,5-dihydro-1H-imidazole, monohydrochloride

硼酸(1KG     Boric Acid 10043-35-3; 99.5%

Zoledronic Acid hydrate 500 mg     P,P-[1-hydroxy-2-1H-imidazol-1-ylethylidene]bis-phosphonic acid monohydrate; Zoledronic Acid hydrate

8-methyl Nonanoic Acid 500 mg     8-methyl Nonanoic Acid; Isocapric Acid 8-methyl Nonanoic Acid

G3335; H-Trp-Glu-OH     PPARγ Antagonist, G3335
FAAH Substrate 1 ea     FAAH Substrate

*標記單甲基化組蛋白H3K27多肽     Biotinylated Monomethyl Histone H3K27 Peptide 200 ul

DEPMPO-biotin 250 ug     N-[3-[[5-[3aS4S,6aR-hexahydro-2-oxo-1H-thieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-1-oxopentyl]amino]propyl]-[2S,3R-2-diethoxyphosphinyl-3,4-dihydro-2-methyl-1-oxido-2H-pyrrol-3-yl]methyl ester-carbamic acid; DEPMPO-biotin

Benzydamine 10 mg     N,N-dimethyl-3-[[1-phenylmethyl-1H-indazol-3-yl]oxy]-1-propanamine

HA-1100 hydrochloride 5 mg     5-[hexahydro-1H-1,4-diazepin-1-ylsulfonyl]-12H-isoquinolinone monohydrochloride; Hydroxyfasudil; HA-1100 hydrochloride

Tetradecyl Phosphonate (5 g)     Tetradecyl Phosphonate, tetradecylphosphonic acid
Human Plasma 100 dtn     Human Plasma

BRD32048 5 mg     N2-4-metxoxypxenyl-6-1-piperidinylmetxyl-1,3,5-triezine-2,4-diamine

yenine 5。5酰進 [相當于Cy5。5酰進]     yenine 5。5 hydrazide [equivalent to Cy5。5 hydrazide]

Butaprost free acid 1 mg     9-oxo-11alpha。,16S-dixy7noxy-17-cyclobutyl-prost-13E-en-1-oic acid; 15-deoxy-16S-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1|(±)-15-deoxy-16S-xy7noxy-17-cyclobutyl PGE1; Butaprost free acid

Arachidonoyl Cyclopropylamide 100 mg     N-cyclopropyl-5Z,8Z11Z,14Z-eicosatetraenamide; ACPA; Arachidonoyl Cyclopropylamide

4,4-Difluoro-8-4-ethynylpxenyl-1,3,5,7-tetrametxyl-4-bora-3a4a-diaza-s-indacene     BODIPY-Acetylene Reagent
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真菌種屬鑒定 PCR Mix 6100 次保存TMAOMedium

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