產(chǎn)品名稱:MEF 小鼠胚胎成纖維細胞培養(yǎng)
英文名稱:MEFmouse embryonic fibroblast cells
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號:FS-X0053
MEF 小鼠胚胎成纖維細胞培養(yǎng)的運輸和保存
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們?nèi)〉?/a>。
MEF 小鼠胚胎成纖維細胞培養(yǎng)培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換 液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1,細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。
3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
mitogen,PWM ELISA Kit
人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
人preptin ELISA試劑盒 進口/分裝 Human preptin ELISA Kit
人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit
人成骨生長肽(OGP)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Osteogenic Growth Peptide,OGP ELISA Kit
人*(GSH)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human glutathione,GSH ELISA Kit
人17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human 17-ketosteroids,17-KS ELISA Kit
人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human 17-Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit
人組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Cathepsin K,cath-K ELISA Kit
人骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human bone morphogenetic proteins,BMPs ELISA Kit
人血凝素(HA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human hemagglutinin,HA ELISA Kit
人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human adipose differentiation-related protein,ADRP ELISA Kit
人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Caldesmon,CALD ELISA Kit
人鈣調(diào)磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human calcineurin,CaN ELISA Kit
人低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human low density lipoprotein,LDL ELISA Kit
人骨堿性磷酸酶(BALP)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human bone alkaline phosphatase,BALP ELISA Kit
人*(CTX)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Cyclophosphamide,CTX ELISA Kit
人β羥丁酸(β-OHB)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Beta-Hydroxybutyric Acid,β-OHB ELISA Kit
人高密度脂蛋白*(HDL-C)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISA Kit
人高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human High density lipoprotein,HDL ELISA Kit
人α*S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human α-glutathione S-transferases,α-GST ELISA Kit
MEF 小鼠胚胎成纖維細胞培養(yǎng)人同型半*(Hcy)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Homocysteic acid,Hcy ELISA Kit
人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human free fatty acids,F(xiàn)FA ELISA Kit
人骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human osteonectin,ON ELISA Kit
人*(FA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Folic acid,F(xiàn)A ELISA Kit
人內(nèi)毒素(ET)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human endotoxin,ET ELISA Kit
人*A(CsA)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Cyclosporine A,CsA ELISA Kit
人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒 進口/分裝 Human Leukotriene C4,LT-C4 ELISA Kit