產(chǎn)品名稱(chēng)：5-8F 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系保存運(yùn)輸
英文名稱(chēng)：5-8Fhighly metastaticnasopharyngeal carcinoma cell line
規(guī)格：5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-X0148
5-8F 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系保存運(yùn)輸的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理：
1）收到細(xì)胞后，請(qǐng)檢查是否漏液，如果漏液，請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2）請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3）棄去T25瓶中的培養(yǎng)基，添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4）如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)（90%以上）請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代，傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5）接到細(xì)胞次日，請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
5-8F 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系保存運(yùn)輸培養(yǎng)操作流程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基（F-12K，GIBCO,貨號(hào)21127-022），90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出，移入15ml離心管中，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例；
      1，細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗一遍后加入1ml*，細(xì)胞變圓脫落后，加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2，4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml，每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

 非酶細(xì)胞裂解液    英文名稱(chēng)：    NECDS    規(guī)格:    100 ml        
細(xì)胞凍存液    英文名稱(chēng)：    CFM    規(guī)格:    50 ml        
無(wú)血清細(xì)胞凍存液    英文名稱(chēng)：    SF-CFM    規(guī)格:    50 ml        
臺(tái)盼藍(lán)    英文名稱(chēng)：    TB    規(guī)格:    50 ml        
磷酸鹽緩沖注    英文名稱(chēng)：    DPBS    規(guī)格:    500 ml        
*    英文名稱(chēng)：    HBSS    規(guī)格:    500 ml        
多聚賴(lài)氨酸 1 mg/ml    英文名稱(chēng)：    PLL    規(guī)格:    1 ml        
多聚賴(lài)氨酸10 mg/ml    英文名稱(chēng)：    PLL    規(guī)格:    1 ml        
胎牛血清    英文名稱(chēng)：    FBS    規(guī)格:    500 ml        
*/*溶液    英文名稱(chēng)：    P/S    規(guī)格:    5 ml        
*/*溶液    英文名稱(chēng)：    P/S    規(guī)格:    100 ml        
抗真菌溶液    英文名稱(chēng)：    AMS    規(guī)格:    50 ml        
抗霉菌溶液    英文名稱(chēng)：    ABAMS    規(guī)格:    50 ml        
細(xì)胞培養(yǎng)超純水    英文名稱(chēng)：    CCGW    規(guī)格:    500 ml        
肌細(xì)胞分離液    英文名稱(chēng)：    MDS    規(guī)格:    100 ml        
牛腦垂體提取物    英文名稱(chēng)：    BPE    規(guī)格:    25 mg        
牛腦垂體提取物    英文名稱(chēng)：    BPE    規(guī)格:    100 mg        
胰島素鐵硒傳遞蛋白 100x    英文名稱(chēng)：    ITS    規(guī)格:    10 ml        
左旋*溶液 200 mM    英文名稱(chēng)：    L-Gue    規(guī)格:    100 ml        
非必需氨基酸 100X    英文名稱(chēng)：    NEAA    規(guī)格:    100 ml        
纖維粘連蛋白-牛源    英文名稱(chēng)：    BPF    規(guī)格:    1mg        
I 型膠原細(xì)胞檢測(cè)試劑盒    英文名稱(chēng)：    Col    規(guī)格:    48 tests/48 well plate        
纖維母細(xì)胞粘附檢測(cè)試劑盒    英文名稱(chēng)：    Fibro    規(guī)格:    48 tests/48 well plate        
MTT細(xì)胞活力和增殖檢測(cè)試劑盒    英文名稱(chēng)：    MTT    規(guī)格:    1000 tests/96 well plate        
WST-1細(xì)胞活力和增殖檢測(cè)試劑盒    英文名稱(chēng)：    WST    規(guī)格:    1000 tests/96 well plate        
細(xì)胞衰老檢測(cè)試劑盒    英文名稱(chēng)：    CSA    規(guī)格:    50 tests/53 mm plate        
5-8F 人高轉(zhuǎn)移鼻咽癌細(xì)胞系保存運(yùn)輸β-半乳糖苷酶比色檢測(cè)試劑盒    英文名稱(chēng)：    GalC    規(guī)格:    50 tests/53 mm plate        
LDH細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒    英文名稱(chēng)：    LDH    規(guī)格:    500 tests/96 well plate        
TUNEL色標(biāo)法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒    英文名稱(chēng)：    TUNEL    規(guī)格:    50 tests/96 well plate        
一氧化氮色標(biāo)法檢測(cè)試劑盒    英文名稱(chēng)：    NO    規(guī)格:    250 tests/96 well plate        
硝基苯磷酸鈉（pNPP）磷酸酶檢測(cè)試劑盒    英文名稱(chēng)：    pNPP    規(guī)格:    500 tests/96 well plate        
孔雀綠磷酸鹽檢測(cè)試劑盒    英文名稱(chēng)：    MGmP    規(guī)格:    2500 tests/96 well plate        
比色法鈣分析試劑盒    英文名稱(chēng)：    CCA    規(guī)格:    250 tests/96 well plate        
活/死細(xì)胞染色試劑盒    英文名稱(chēng)：    CSK    規(guī)格:    1000 tests/96 well plate        
比色法GAPDH分析試劑盒    英文名稱(chēng)：    GAPDH    規(guī)格:    1000 tests/96 well plate