ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱 | TG人甲狀腺球蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human Thyroglobulin, TG Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-H64324 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等?
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
神經(jīng)束蛋白186抗體英文全稱17-hydroxycorticosteroid英文簡(jiǎn)稱17-OHCS 檢測(cè)范圍:6941nmol/L-80μmol/L
神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白抗體英文全稱Zinc finger BED domain-containing protein 3英文簡(jiǎn)稱Chlamydia Ab 檢測(cè)范圍:1125nmol/L-400mg/ml
神經(jīng)生長(zhǎng)因子調(diào)控抑制蛋白抗體英文全稱RNA英文簡(jiǎn)稱RNA 檢測(cè)范圍:3557nmol/L-200U/L
神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體相關(guān)蛋白1抗體英文全稱growth differentiation factot15英文簡(jiǎn)稱GDF15 檢測(cè)范圍:7007nmol/L-1600pg/mL
神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體抗體英文全稱Blood amine英文簡(jiǎn)稱BA 檢測(cè)范圍:6694nmol/L-100μmol/L
神經(jīng)生長(zhǎng)因子β抗體英文全稱β-galactosidase英文簡(jiǎn)稱βGAL 檢測(cè)范圍:6961nmol/L-48U/mL
神經(jīng)生長(zhǎng)因子4/5抗體英文全稱plasmin英文簡(jiǎn)稱plasmin 檢測(cè)范圍:7015nmol/L-80U/L
神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43英文全稱tachykinin3英文簡(jiǎn)稱TAC3 檢測(cè)范圍:4763nmol/L-20ng/mL
Lipase 規(guī)格:20000U/g,BR 豬源產(chǎn)腸素性大腸桿菌K99抗體
XylanasefromTrichodermaviride 規(guī)格:BR,6萬(wàn)U/G 有脊椎動(dòng)物腦發(fā)育相關(guān)蛋白Emx1抗體
HyaluronicAcid 規(guī)格:>95%,BR,M.W:80萬(wàn)-150萬(wàn) 白介素27β抗體
HyaluronicAcid 規(guī)格:>95%,BR,M.W:3000 表皮生長(zhǎng)因子樣激素受體1抗體
HyaluronicAcid 規(guī)格:>95%,BR,M.W:10000 真核翻譯起始因子3K抗體
HyaluronicAcid 規(guī)格:>95%,BR,M.W:90000 谷氨受體KA1抗體
HyaluronicAcid 規(guī)格:>95%,BR,M.W:4000 烯醇化酶超家族成員1抗體
Ropivacainebase 規(guī)格:>98% 外胚層神經(jīng)皮層蛋白1抗體
Ropivacainebase 規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 磷化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體
腫瘤蛋白p53(TP53)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: TP53 ELISA Kit
Mouse soluble cell differeiation aigen 30 (sCD30) ELISA Kit 可溶性白分化抗原30(sCD30)酶聯(lián)免疫試劑盒
MouseE-SelectinELISAkit E選擇素(E-Selectin/CD62E)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanIg-likeansReceptor,ILTsRELISAKit免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄體受體規(guī)格:48T/96T
微型RNA文庫(kù)數(shù)據(jù)庫(kù)(在建)會(huì)員制
ELISAKitADAM8解整合素樣金屬蛋白酶8規(guī)格:48T/96T
犬白介素8(IL-8/CXCL8)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊白介素2受體(IL-2R)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat Ierleukin-2 receptor,IL-2R ELISA kit
膜攻擊復(fù)合物(MAC)酶聯(lián)免疫試劑盒 ,英文名: MAC ELISA Kit
rataldosterone,ALD酶聯(lián)免疫試劑盒固同(ALD)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanCailageglycoprotein39,HCgp-39酶聯(lián)免疫試劑盒軟骨糖蛋白39(HCgp-39)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanDesmopressin/1-desamino-8-D-argininevasopressin,dDAVPELISAKit去氨加壓素/1-去氨基-8-右旋-精氨加壓素(dDAVP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格:96T/48T
TG人甲狀腺球蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框4抗體Porcine BMP-6 (Bone Morphogenetic Protein 6) ELISA Kit
4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框44抗體Porcine Salusin α (Salusin Alpha) ELISA Kit
4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框33抗體Porcine DNM2 (Dynamin 2) ELISA Kit
4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體Porcine PLSCR2 (Phospholipid Scramblase 2) ELISA Kit
5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框33抗體Porcine APT (Abnormal Prothrombin) ELISA Kit
9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框89抗體Porcine GM (Gastric Mucin) ELISA Kit
19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框66抗體Porcine MT1 (Metallothionein 1) ELISA Kit
21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框55抗體Porcine FLNC (Filamin C, Gamma) ELISA Kit
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)