ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！
產(chǎn)品名稱 | Thymosin人胸腺肽ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Human Thymosin Elisa Kit |
貨號 | FS-H64309 |
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
軸絲動力蛋白重鏈9抗體英文全稱δ-Aminolevulinic Acid 英文簡稱ALA 檢測范圍:3172nmol/L-800pg/mL
軸絲動力蛋白7抗體英文全稱Protoporphyrinogen Oxidase英文簡稱PPOX 檢測范圍:3171nmol/L-60U/L
軸絲動力蛋白10抗體英文全稱β-Carotenoids英文簡稱β-Carotenoids 檢測范圍:3169nmol/L-80μg/mL
軸蛋白1抗體英文全稱Trypanosomacruzi英文簡稱Trypanosomacruzi 檢測范圍:775nmol/L-8ng/mL
周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2抗體英文全稱Carboxyl peptide A英文簡稱CPA 檢測范圍:7860nmol/L-20ng/mL
周期素依賴性激酶樣5抗體英文全稱Epstein-Barr virus gp350 antibody英文簡稱EBV-gp350-Ab 檢測范圍:1892nmol/L-
周期素依賴性激酶9抗體英文全稱acting tranion factor 6英文簡稱ATF6 檢測范圍:2595nmol/L-2000pg/mL
周期素依賴性激酶8抗體英文全稱NPY1R英文簡稱NPY1R 檢測范圍:2482nmol/L-20ng/mL
LidocaineHCl 規(guī)格：含量測定 2-氨基乙硫醇雙加氧酶抗體
LisinoprilDihydrate 規(guī)格：>98%,二水合物可用于培養(yǎng) ACN9蛋白抗體
LisinoprilDihydrate 規(guī)格：含量測定 雙鏈RNA腺苷脫氨基酶抗體（N端）
LobelineHydrochloride 規(guī)格：>98%,進(jìn)分 腺苷激酶抗體
Lonidamine 規(guī)格：>99%,BR 絲氨/蘇氨蛋白激酶ATR抗體
Lopinavir 規(guī)格：>99% 去整合素樣金屬蛋白酶18抗體
Lopinavir 規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 去整合素樣金屬蛋白酶19抗體
Loratadine 規(guī)格：>99% 原癌基因AF4蛋白抗體
Loratadine 規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶15型抗體
中性粒激活蛋白3(NAP3)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： NAP3 ELISA Kit
Mouse soluble cell differeiation aigen 86 (B7-2/sCD86) ELISA Kit 可溶性白分化抗原86(B7-2/sCD86)酶聯(lián)免疫試劑盒
MouseFibronectin,FNELISAKit 纖連蛋白(FN)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanhypotheticalproteinLOC433328ELISAKit假定蛋白LOC433328規(guī)格：48T/96T
維生素B12高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitCTGF結(jié)締組織生長因子規(guī)格：48T/96T
犬胱天蛋白酶3(Casp-3)酶聯(lián)免疫試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
山羊超氧化物歧化酶2，線粒體(SOD2)酶聯(lián)免疫試劑盒 Goat superoxide dismase 2,mitochondrial,SOD2 ELISA kit
膜內(nèi)?；拿?/font>(ANPEP)酶聯(lián)免疫試劑盒 ，英文名： ANPEP ELISA Kit
RatActivatedLeukocyteCellAdhesionMolecule,ALCAM酶聯(lián)免疫試劑盒白活化黏附因子(ALCAM)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
Humancarbohydrate-deficieansferrin,CDT酶聯(lián)免疫試劑盒糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
Humandeltasleep-inducingpeptide,DSIPELISAKit促睡眠肽(DSIP)酶聯(lián)免疫試劑盒規(guī)格：96T/48T
Thymosin人胸腺肽ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理腫瘤/抗原13抗體2-苯肼鹽鹽Porcine IL-23 (Interleukin 23) ELISA Kit
鈣反應(yīng)因子抗體2-苯肼鹽鹽Porcine NGF (Nerve Growth Factor) ELISA Kit
分裂周期蛋白2亞型1抗體2-苯肼鹽鹽Porcine CENPB (Ceomere Protein B) ELISA Kit
20號染色體開放閱讀框74抗體2-苯肼鹽鹽Porcine ER (Estradiol Receptor) ELISA Kit
促腎上腺皮質(zhì)釋放激素受體2抗體9-溴壬Porcine MUC20 (Mucin 20) ELISA Kit
20號染色體開放閱讀框132抗體9-溴壬Porcine GTF2A1 (General Tranion Factor IIA, Polypeptide 1) ELISA Kit
IV型膠原蛋白/4型膠原蛋白/膠原蛋白4抗體2-溴-3-硝苯Porcine EL/LIPG (Endothelial Lipase) ELISA Kit
煙型乙酰膽受體B2抗體2-溴-3-硝苯Porcine sAC (Soluble Adenylate Cyclase) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)
