活細(xì)胞核染料吖啶橙正在熱銷的產(chǎn)品：FOXO3A 叉頭蛋白O3A抗體酰酮鉿 97%
Phospho-FoxO3a (Ser318/321) 化叉頭蛋白3A抗體酰酮鐵 98%
Phospho-FoxO3a (Ser294) 叉頭蛋白3A抗體酰酮錳 97%
Phospho-FoxO3a (Ser253) 化叉頭蛋白3A抗體酰酮鎳 95%
FOXO4 叉頭蛋白O4抗體酰酮鉑(II) 97%
Ph
產(chǎn)品介紹:
橙是一種熒光色素，其檢測(cè)激發(fā)濾光片波長(zhǎng)488nm。阻斷濾光片波長(zhǎng)515nm。它與細(xì)胞中DNA 和RNA 結(jié)合量存在差別，可發(fā)出不同顏色的熒光，與DNA 結(jié)合量少發(fā)綠色熒光，與RNA 結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性，能透過(guò)細(xì)胞膜，使核DNA 和RNA 染色。 在熒光顯微鏡下觀察，橙可透過(guò)正常細(xì)胞膜，使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細(xì)胞中，因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體。橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光，或黃綠色碎片顆粒；而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。橙AO 常與溴化乙啶EB 合用雙染，因EB 只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光，由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。 用于細(xì)胞核染色時(shí)，推薦的橙工作濃度為0.1%。一般孵育條件是室溫避光15 分鐘。由于不同細(xì)胞對(duì)橙的攝取能力不同，該法不一定適用所有細(xì)胞。 儲(chǔ)存：-20℃，避光，有效期12月。 |
中文名稱：活細(xì)胞核染料吖啶橙
英文名稱：Acridine Orange；AO
產(chǎn)品規(guī)格：25mg
貨號(hào)：FS-X9815
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： 1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??； 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化； 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)； 5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 二、免疫熒光鑒定： 1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min； 4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜； 5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h； 6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟：
1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；
4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
δ樣蛋白1同源物(δLK1)英文名：δLK1 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框177抗體包裝1g
γ-內(nèi)啡肽(γEP)英文名：γEP 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框183抗體包裝250mg
γ-谷酰轉(zhuǎn)移1(γGT1)英文名：γGT1 克侖特羅/瘦肉精抗體包裝25g
γ-基丁A受體α2(γABRα2)英文名：γABRα2 6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框151抗體包裝5g
γ-基丁(γABA)英文名：γABA 15號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框52抗體包裝100mg
β-血小板球蛋白(βTG)英文名：βTG 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框89抗體包裝1g
β細(xì)胞(βTC)英文名：βTC BCL10結(jié)合蛋白和激活核轉(zhuǎn)錄因子抗體包裝5g
β-位淀粉樣前體蛋白裂解1(βACE1)英文名：βACE1 凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體包裝25g
β-內(nèi)啡肽(βEP)英文名：βEP 慢性淋巴白血病缺失基因6蛋白抗體包裝5g
β-骨膠原交聯(lián)(βCTx)英文名：βCTx 13號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框38抗體包裝25g
β2-微球蛋白(β2M)英文名：β2M 14號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框140抗體包裝5g
α-生育酚轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TTPα)英文名：TTPα 陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)樣蛋白2抗體包裝1g
α-乳清蛋白(αLA)英文名：αLA 15號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框62抗體包裝5g
α-內(nèi)啡肽(αEP)英文名：αEP 15號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框41抗體包裝100g
α-骨膠原交聯(lián)(αCTx)英文名：αCTx 環(huán)核陽(yáng)離子通道蛋白α2抗體包裝25g
蘇云金芽胞桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR,可用于培養(yǎng)異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K試劑盒異牡荊;Isovitexin with
暫無(wú)Pararhodobacter│aggregans 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品異質(zhì)性胞核核糖核蛋白I試劑盒右旋龍腦;Borneol
香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于培養(yǎng)異質(zhì)性胞核核糖核蛋白H試劑盒油;cis-9-Octadecenoi
活細(xì)胞核染料吖啶橙氧化節(jié)桿 1-溴-4-正十二烷基苯C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白5
猴頭 醋烏利司他蛋白激M2
馬克斯克魯維酵母 5-溴-2-芐氧基-6-磷酯Cε鏈
出芽短梗霉 磷三異丁酯狂犬病抗體
聚生殼 2-氨基-3,5-二氟膜輔蛋白
球孢白僵 4-芐基嗎啉-2-甲α-乳白蛋白
釀酒酵母 2-(甲氧基)苯抗骨骼肌抗體
根瘤 3-甲酰氨基-3-苯基Ⅱ型膠原代謝產(chǎn)物C2C
松口蘑 6,6'-二溴-N,N'-(2-辛基十二烷基)-異靛藍(lán)小而密低密度脂蛋白膽固
斑玉蕈 2-溴-3-氨基-6-snap-tag蛋白
醬油曲霉 2-溴-3-氨基-4-血小板衍化生長(zhǎng)因子A
釀酒酵母 3-氨基-4-溴-2-CXC趨化因子受體5
蝦苗殺蝦微桿 4-乙氧基-2,3-二氟苯甲單純皰疹病1IgG抗體
果生鏈核盤 Dowex? 50WX2-100離子交換樹(shù)脂單純皰疹病1IgM抗體
根瘤 4-溴甲基-2--頻那酯水痘-帶狀皰疹病IgG抗體
