中文名稱 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體
英文名稱 Anti-phospho-E2F1 (Ser364)
濃 度: 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 48kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human E2F1 around the phosphorylation site of Ser364
亞 型 IgG
純化方法 affinity purified by Protein A
儲(chǔ) 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蠟切片需做抗原修復(fù))
別 名 E2F1 (phospho S364); E2F1 (phospho Ser364); p-E2F1 (S364); p-E2F1 (Ser364); E2F 1; E2F transcription factor 1; E2F-1; E2f1 E2F transcription factor 1; KIAA4009; mKIAA4009; OTTHUMP00000030661; PBR 3; PBR3; PRB binding protein E2F 1; PRB-binding protein E2F-1; RBAP 1; RBAP-1; RBAP1; RBBP 3; RBBP-3; RBBP3; RBP 3; RBP3; Retinoblastoma associated protein 1; Retinoblastoma binding protein 3; Retinoblastoma-associated protein 1; Retinoblastoma-binding protein 3; Transcription factor E2F1; E2F1_HUMAN.
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 0.1ml/100μg |
貨號(hào) | YSRIBIO-018253 |
抗體的熒光標(biāo)記法:
(一)基本原理
賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價(jià)結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細(xì)胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。
(二)儀器和試劑
1.待偶聯(lián)抗體;
2.碳suan氫鈉緩沖液;
3.疊氮鈉;
4.庵氰酸熒光素;
5.電磁攪拌器。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨suan殘基,某些組氨suan殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨suan的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
三乙 CP,75%含RUN域半胱氨豐富域芐氯1相互作用蛋白(Rubicon)ELISA試劑盒轉(zhuǎn)錄中介因子1β檢測試劑盒
三乙 for HPLC,>99.0% (GC)含RNA結(jié)合冷休克域蛋白E1(CSDE1)ELISA試劑盒磷化外紡錘體樣蛋白1檢測試劑盒
三乙 ≥99.0% (GC) 含Rho關(guān)聯(lián)卷曲螺旋蛋白激2(Rock2)ELISA試劑盒鳥交換因子檢測試劑盒
三乙 色譜固定液,75℃+++++含RCC1和BTB域蛋白2(RCBTB2)ELISA試劑盒能受體P2Y11檢測試劑盒
三鹽鹽 98%含PR域蛋白10(PRDM10)ELISA試劑盒血管緊張Ⅰ受體抗體檢測試劑盒
二氟 98%含MOCO硫化羧基端域蛋白1(MOSC1)ELISA試劑盒載脂蛋白L2檢測試劑盒
二溴乙酯 97%含MANSC域蛋白1(MANSC1)ELISA試劑盒蛋白酪氨磷O檢測試劑盒
二氟鈉 97%含Kazal型絲氨蛋白抑制劑域蛋白1(KAZALD1)ELISA試劑盒核糖核蛋白B檢測試劑盒
氟化鋁,三水 AR,98%含F(xiàn)YVE域鋅指蛋白27(ZFYVE27)ELISA試劑盒鳥檢測試劑盒
氟化鋁,三水 CP,97%含F(xiàn)YVE域鋅指蛋白26(ZFYVE26)ELISA試劑盒類泛蛋白檢測試劑盒
安息香 CP,98%含F(xiàn)YVE域鋅指蛋白16(ZFYVE16)ELISA試劑盒非磷化酮脫氫檢測試劑盒
安息香 99.5%含CUB域蛋白1(CDCP1)ELISA試劑盒前膠原賴氨-1,2-酮戊二-5-雙加氧1檢測試劑盒
安息香乙 97%含BED型鋅指蛋白3(ZBED3)ELISA試劑盒血小板糖蛋白V檢測試劑盒
鄰氯 GR,99%含Ⅲ型纖連蛋白域蛋白5(FNDC5)ELISA試劑盒血小板衍化生長因子DD檢測試劑盒
N,N-二乙基羥 98%海藻糖(TREH)ELISA試劑盒激活受體樣激1檢測試劑盒
Anti-phospho-E2F1 (Ser364)抗體Anti-Trk B 酪氨激B抗體
Anti-Trk C 酪氨激C抗體(神經(jīng)生長因子受體的一種)
Anti-Trop-2 原肌球蛋白抗體
Anti-TRP2 酪氨相關(guān)蛋白2抗體
Anti-Thioredoxin 硫氧還蛋白抗體
Anti-TRP1/gp75 酪氨相關(guān)蛋白1抗體
Anti-TRPM2 瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白抗體(M亞家族)
Anti-c/Troponin T 心肌特異性肌鈣蛋白T抗體