銀耳菌種母種的制作方法!
銀耳菌種母種的制作方法!
銀耳菌種必須同時(shí)有銀耳菌絲和香灰菌絲才能出耳,怎樣制作銀耳菌種的母種?下面來(lái)簡(jiǎn)單介紹一下。在制作母種的過(guò)程中,可以選用耳木分離法和孢子分離法。
一、耳木分離法
耳木分離出來(lái)的菌種,已有銀耳菌絲和香灰菌絲。其分離步驟如下。步,當(dāng)1~2批銀耳生長(zhǎng)時(shí),選擇銀耳生長(zhǎng)旺、朵大、色白、肉厚、開(kāi)片正常、產(chǎn)量高、無(wú)病蟲(chóng)害的耳木,從長(zhǎng)有子實(shí)體的部位鋸下1~2厘米厚的一段,去掉耳基及樹(shù)皮,用75%的酒精涂擦其表面,然后放入消毒的接種箱內(nèi)。
第二步,把木塊浸入0.1%液中20~30秒鐘,用無(wú)菌水沖洗殘留的藥液,再用無(wú)菌紗布揩干。第三步,用消毒的小榔頭和*先劈取耳基附近的木片(選有大理石花紋處),再把木片劈成如火柴桿粗的小木條(或用利刀削下粉末狀的木屑)。第四步,用消毒的鑷子把一個(gè)木條(或小木屑)接入斜面培養(yǎng)基中。
第五步,把試管置23~25℃培養(yǎng),當(dāng)木條上(或木屑上)長(zhǎng)出纖細(xì)的白色菌絲,并延伸至培養(yǎng)基上。這時(shí)培養(yǎng)基的顏色變黃轉(zhuǎn)黑,表面出現(xiàn)淺灰色斑紋,這就是香灰菌絲。7天后,木條上出現(xiàn)短絨狀菌絲,同時(shí)分泌白色或淡黃色水珠,這就是銀耳菌絲。生長(zhǎng)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)紅、綠、黃、黑等孢子和螨類害蟲(chóng)要及時(shí)淘汰,但淺黃色的凸起糊狀小菌落是芽孢,不是雜菌。第六步,挑取少許銀耳菌絲和香灰菌絲,接種于新的斜面培養(yǎng)基上,進(jìn)行擴(kuò)大,1周后菌絲長(zhǎng)滿試管,即成母種。
二、孢子分離法
孢子分離的菌種萌發(fā)成芽孢子(銀耳孢子在一般馬鈴薯洋菜培養(yǎng)基上易形成芽孢子)或銀耳菌絲,可用于栽培種復(fù)壯或同香灰菌絲混合制成母種。其步驟如下。步,取數(shù)只50毫升三角瓶,每只裝0.5厘米厚的培養(yǎng)基,滅菌備用。第二步,選擇朵大、肉厚、色白、開(kāi)片正常、大小適中、無(wú)雜菌和病蟲(chóng)害、八九成熟的鮮耳作為種耳,移入消毒的接種箱中,用無(wú)菌水反復(fù)沖洗幾次。
第三步,用消毒紗布或吸水紙,把耳片表面揩干。第四步,用消毒的*割取一小片耳瓣,掛于消毒的金屬鉤子上,迅速移入三角瓶中,鉤子另一端鉤在三角瓶口上,使耳瓣距離培養(yǎng)基表面2~3厘米,塞上棉塞。第五步,把三角瓶置23~25℃下培養(yǎng)48小時(shí),培養(yǎng)基表面可見(jiàn)霧狀的孢子及乳白色、糊狀、邊緣光滑凸起的小菌落。這時(shí),在消毒的接種箱內(nèi)取出鉤子和耳瓣,塞好棉塞,繼續(xù)在23~25℃下培養(yǎng),2~3天后,培養(yǎng)基表面就出現(xiàn)乳白色、半透明狀,略有光澤,表面粘稠,邊緣光滑,*隆起的芽孢菌落。
芽孢在一般培養(yǎng)基上不易萌發(fā),但在以下幾種培養(yǎng)基上可以萌發(fā):玉米粉60%,木屑34%,骨粉1%,過(guò)磷酸鈣1%,硫酸銨0.1%;細(xì)米粉98%,骨粉1%,硫酸銨0.1%;米粉50克,花生米(細(xì)碎)40克,蔗糖20克,瓊脂20克,水1000毫升;馬鈴薯200克(去皮),瓊脂23克,蔗糖20克,過(guò)磷酸鈣2克,水1000毫升,pH5.6~6.2;細(xì)米粉500克,麥麩500克,骨粉10克,過(guò)磷酸鈣10克,硫酸銨1克,充分混勻,用水調(diào)成膏狀,搓條裝入試管,用竹片壓成斜面;同香灰菌絲配合,或在香灰菌絲浸出液制成的培養(yǎng)基上。
香灰菌絲分離法制作母種。其分離培養(yǎng)同前述耳木分離法,即用接種刀小心地去掉耳木表層老菌絲,取出深處有黑色花紋部分,搗成米粒大小,接種于斜面培養(yǎng)基上。香灰菌絲爬壁力強(qiáng),挑取先端白色部分移管純化,經(jīng)3~5次純化,可得到純香灰菌絲。也可以取一瓶已長(zhǎng)到底的銀耳木屑菌種,把瓶打破,取出菌柱,用接種針刮上面的灰綠色或黑色處,取得少量孢子,接種于斜面培養(yǎng)基上,培養(yǎng)純化。這兩種分離方法,前一種生活力強(qiáng)。
也可以用混合培養(yǎng)制母種。把孢子分離法培養(yǎng)出來(lái)的銀耳菌絲,和香灰菌絲分離法純化得到的香灰菌絲混合培養(yǎng),即成母種。值得注意的是,不同地區(qū),不同耳木分離的銀耳菌絲和香灰菌絲不能隨便調(diào)換,隨便組合,否則就有可能失敗。母種培養(yǎng)方法是先將銀耳菌絲接種于斜面培養(yǎng)基,置于25℃培養(yǎng),待銀耳菌絲直徑長(zhǎng)至1厘米,再接香灰菌絲,待菌絲蔓延至全試管,即為母種。必須指出,銀耳菌絲少,香灰菌絲多,將來(lái)就不會(huì)出耳,或者出耳率很低。
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