TOSOH 提供了一系列用陰陽(yáng)離子交換方式進(jìn)行分析和分離生物分子的高效液相色譜柱.在任何一種離子交換模式既有甲基丙烯酸酯也有硅膠基的色譜柱。蛋白質(zhì)、多肽、DNA 和、核苷酸衍生出來(lái)的RNA以及其他核酸片斷都是TSK-GEL 陰離子交換色譜柱分析分離的典型樣品?;诰郾揭蚁┗w材料的陰離子交換柱適合用于小分子量的糖類(lèi)氨基酸、核酸堿基及小分子的備選藥物。
新型BioAssit色譜柱特性及優(yōu)點(diǎn)
• 即使對(duì)較大的蛋白質(zhì)也具有高容量>100KD,
• 取得相同樣品量的流動(dòng)相耗量小
• 具有能提供快速傳輸?shù)?孔結(jié)構(gòu),更加尖銳的峰形改善了分析和分離
• 硬件為具有生物相容性的PEEK柱,由于吸附產(chǎn)生的樣品損失較小
聚合物基的離子交換色譜柱特性及優(yōu)點(diǎn)
• 甲基丙烯酸酯骨架化學(xué)穩(wěn)定性(pH2-12)
• 較大的孔尺寸(1000A)排出的蛋白質(zhì)極限為5000,000Da
• 無(wú)孔樹(shù)脂基體柱(NPR)
• 機(jī)械性能穩(wěn)定
• 耐堿、有機(jī)溶劑、改性劑表面劑重復(fù)清洗
• 對(duì)大多數(shù)生物聚合物使用相同住
• 快速Q(mào)C分析和工藝監(jiān)測(cè)
• 降低溶劑消耗和分析時(shí)間
硅膠基體的離子交換色譜柱特性及優(yōu)點(diǎn)
較小的孔尺寸2SW=125Å、3SW=250Å,適合分析較小的分子量的樣品,如核苷、備選藥物、兒茶酚、小肽。
TSK–GEL 陰離子交換色譜柱特性及優(yōu)點(diǎn)
• 填充了多孔結(jié)構(gòu)和化學(xué)鍵合的樹(shù)脂TSK gel BIoAssist Q 柱對(duì)分子量大小不同的蛋白質(zhì)和核酸具有高交換容量。
• TSK-GEL DNA–NPR 柱可用于PCR片段的分析
• TSK-gel SuperQ-5pw 柱由于采用了新的鍵合化學(xué)技術(shù),所以比TSK-gel DEAE -5pw柱有更高的交換容量。
TSK-GEL 陽(yáng)離子交換色譜柱特性及優(yōu)點(diǎn)
• TSK gel BIoAssist S對(duì)中等和大分子量的蛋白質(zhì)具有高度交換容量
• 因小孔徑和大比表面積 TSK gelDEAE-2SW與小分子和中等分子的蛋白質(zhì)結(jié)合能力高于5pw兩倍。
TSK離子交換柱選擇
樣品類(lèi)型 | 分子量范圍(Da) | Tsk-gel 柱 | pH 范圍 |
氨基酸 多肽和蛋白 | |||
氨基酸 | < 2000 | SAX SCX | 1-14 1-14 |
肽和小蛋白 | <10000 | SCX SP-2SW CM-2SW DEAE-2SW QAE-2SW | 1-14 2-7.5 2-7.5 2-7.5 2-7.5 |
多肽和小蛋白 | 30000 | CM-3SW DEAE-3SW | 2-7.5 2-7.5 |
蛋白 | > 10000-5000000 | BioAssist S BioAssist Q SP-5PW DEAE-5pw CM-5PW | 2-12 |
核酸 | |||
嘌呤和嘧啶 | DEAE-2SW | 2-7.5 2-7.5 | |
核苷 | SP-2SW | 2-7.5 2-7.5 | |
核苷酸 | DEAE-2SW | 2-7.5 | |
寡聚核苷酸 | DEAE-5PW | 2-12 2-12 2-12 2-12 | |
DNA RNA 和 PCR 產(chǎn)品 | DNA-NPR | 2-12 2-12 2-12 2-7.5 | |
其它分子 | |||
單雙糖 | Sugar AX1 ,AXG | 1-14 1-14 1-14 | |
有機(jī)酸 | OAPAK-A | 2-12 |
下面是國(guó)內(nèi)常用的離子交換色譜柱的應(yīng)用實(shí)例
下圖是用陰離子離子交換色譜柱TSK-GEL SUGAR AXG 預(yù)柱反應(yīng)后測(cè)定各類(lèi)糖類(lèi)纖維二糖、麥芽糖、乳糖、鼠李糖、來(lái)蘇糖、核糖、甘露糖、海藻糖、阿拉伯糖、半乳糖、木糖等。
Sample: | 糖的標(biāo)準(zhǔn)品 |
Compound: | 1) Cellobiose, 2) Maltose, 3) Lactose, 4) Rhamnose, 5) Lyxose, 6) Ribose, 7) Mannose, 8) Fucose, 9) Arabinose, 10) Galactose, 11) Xylose, 12) Glucose |
Chromatographic conditions |
Column(s)[Column, Cat.No., Dimension, Particle Size, Number]: |
1) TSKgel Sugar AXG, 8640, 4.6*150(mmI.D.*mm), (um), 1 | |
Phase: A: 0.6 mol/l borate buffer (pH 7.7)B: 0.7 mol/l borate buffer (pH 7.25) | |
Temperature: 70C | |
Detection: 1) FS : ex.: 331 nm em.: 383nm | |
Injection vol: 20ul | |
Sample load: Each of monosaccharide: 25 umol/lumol/l, disaccharide: 50umol/l | |
Note: Post column reactionReaction reagent: 2.5% 2-Cyanoacetamide solution | |
Source/reference: TOSOH Separation Report Vol.: No.: 42 p: 7 - 7(2) ( ) | |
Title: Separation of saccharides on TSKgel Sugar AXG |
下面的譜圖是 采用 OAPAK離子排除 色譜柱,用離子排除色譜 和不同的檢測(cè)器,測(cè)定各種有機(jī)酸 丙酮酸、酒石酸、檸檬酸、蘋(píng)果酸、焦 、乳酸、醋酸、丁二酸 |
Sample: | 有機(jī)酸標(biāo)準(zhǔn)品 |
Compound: | 1) Pyruvic acid, 2) Tartaric acid, 3) Citric acid, 4) Malic acid, 5) Pyroglutamic acid, 6) Lactic acid, 7) Acetic acid, 8) Succinic acid |
Chromatographic conditions |
Column(s)[Column, Cat.No., Dimension, Particle Size, Number]: |
1) TSKgel OApak-P, 16654, 6.0*40(mmI.D.*mm), (um), 1 | |
2) TSKgel OApak-A, 16653, 7.8*300(mmI.D.*mm), (um), 2 | |
Phase: | 0.75 mM sulfuric acid |
Flow rate: | 0.8ml/min |
Temperature: | 60C |
Detection: | 1) CM 2) UV/VIS : 210nm 3) UV/VIS : 450nm |
Injection vol: | 20ul |
Sample load: | 1) 50ppm, 2) 500ppm, 3) 500ppm, 4) 500ppm, 5) 500ppm, 6) 1000ppm, 7) 2000ppm, 8) 1000ppm |
Note: | Peak 4’: Degradation product of malic acid |