產(chǎn)品名稱 | 原代人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 英文名稱 | Human Aortic Endothelial Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號(hào) | GOY-01X0966 |
組織來源 | 主動(dòng)脈組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡介：
人主動(dòng)脈內(nèi)皮分離自主動(dòng)脈組織；主動(dòng)脈是體循環(huán)的動(dòng)脈主干。其運(yùn)行路徑為：升主動(dòng)脈起于左心室，至右側(cè)第2胸肋關(guān)節(jié)高度移行為主動(dòng)脈弓，弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動(dòng)脈；在第12胸椎體高度穿膈的主動(dòng)脈裂孔移行為腹主動(dòng)脈，以上為胸主動(dòng)脈，至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動(dòng)脈；髂總動(dòng)脈在骶髂關(guān)節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動(dòng)脈。主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞是覆蓋在主動(dòng)脈內(nèi)面的單層細(xì)胞，可分泌一系列血管活性物質(zhì)而保持血管穩(wěn)態(tài)，當(dāng)其受到炎癥或其它因素刺激后穩(wěn)態(tài)被破壞而導(dǎo)致一些心血管疾病的發(fā)生。因此，主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞已成為研究心血管疾病發(fā)病機(jī)制及治療藥物的工具。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細(xì)胞，由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至最小的微血管。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人主動(dòng)脈內(nèi)皮采用yi蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人主動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中，盡可能的除去結(jié)締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中，倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中，
4) 2h后，培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基，小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱，確保組織塊不會(huì)飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細(xì)胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時(shí)，去除組織塊，將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
人急性早幼粒白血病細(xì)胞 | 大鼠滑膜細(xì)胞 |
大鼠主動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 流感通用/H9亞型（AIV-U/AIV-H9）檢測試劑盒 (雙重?zé)晒釶CR法) |
大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞 | 流感病毒H5/H9亞型（AIV-H5/H9）檢測試劑盒 (雙重?zé)晒釶CR法) |
大鼠膝關(guān)節(jié)退變軟骨細(xì)胞 | 病豬藍(lán)耳高致病/NADC-30株（PRRSV-M/PRRSV-NADC30）檢測試劑盒（雙重?zé)晒釶CR法） |
人橫紋肌瘤細(xì)胞 | 流感病毒H7/新城疫病毒（AIV-H7/NDV）檢測試劑盒 (雙重?zé)晒釶CR法) |
人血管平滑肌細(xì)胞 | 豬瘟病毒/豬藍(lán)耳病毒通用型/口蹄疫病毒通用型/豬圓環(huán)病毒2型（CSFV/PRRSV-U/FMDV-U/PCV-2）檢測試劑盒(四重?zé)晒釶CR法) |
人口底癌細(xì)胞 | 犬細(xì)小病毒/犬瘟熱病毒(CPV/CDV)檢測試劑盒(雙重?zé)晒釶CR法) |
JEG-3人絨毛膜癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 豬傳染性胃腸炎/豬流行性腹瀉病毒/副豬嗜血桿菌(TGEV/PEDV/HPS)檢測試劑盒(三重?zé)晒釶CR法) |
人脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞 | 流感通用/H7亞型（AIV-U/AIV-H7）檢測試劑盒 (雙重?zé)晒釶CR法) |
人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞 | 口蹄疫通用/塞尼卡谷病毒（FMDV-U/SVV）檢測試劑盒(雙重?zé)晒釶CR法) |
人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 | 流感病毒H9N2亞型（AIV-H9N2）檢測試劑盒（雙重?zé)晒釶CR法） |
小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞 | 豬藍(lán)耳病毒歐洲株/美洲株/高致病株檢測試劑盒（三重?zé)晒釶CR法） |
小鼠調(diào)節(jié)T細(xì)胞 | 原代人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞小反芻獸疫通用型和野毒株（PPR-U/ PPR-W）檢測試劑盒（雙重?zé)晒釶CR法） |
人胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞 | 小反芻獸疫通用型/疫苗株/野毒株（PPR-U/ PPR-V/ PPR-W）檢測試劑盒（三重?zé)晒釶CR法） |
鮑曼不動(dòng)桿菌耐碳青霉烯類抗菌基因(OXA23/OXA24)檢測試劑盒 | 小反芻獸疫通用型/疫苗株（PPR-U/ PPR-V）檢測試劑盒（雙重?zé)晒釶CR法） |
1、您收到細(xì)胞后，請按照以下方法進(jìn)行操作：
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細(xì)胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，再加入培養(yǎng)液終止消化，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當(dāng)量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中，滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞，然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
