產(chǎn)品名稱 | 原代兔子宮頸上皮細(xì)胞 | 英文名稱 | Rabbit Cervical Epithelial Cells |
規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 貨號(hào) | GOY-01X1501 |
組織來源 | 子宮組織 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)信息：包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%YI蛋白酶兔子宮頸上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔子宮頸上皮細(xì)胞分離自子宮頸組織；子宮頸位于子宮下部，近似圓錐體，上端與子宮體相連，下端深入陰道。陰道頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分：宮頸突入陰道的部分稱宮頸陰道部，在陰道穹隆以上的部分稱宮頸陰道上部。宮頸的中央為前后略扁的長(zhǎng)梭性管腔，其上端通過宮頸內(nèi)口與子宮腔相連，其下端通過宮頸外口開口于陰道。內(nèi)外口之間即宮頸管。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內(nèi)分泌狀態(tài)等而變化；宮頸壁由黏膜、肌層和外膜組成。子宮頸可有多種疾病，包括胚胎發(fā)育異常、炎癥、瘤樣病變、良性腫瘤、惡性腫瘤、損傷、宮頸性不孕、輔助生育技術(shù)、宮頸與性、宮頸妊娠等許多問題，體外培養(yǎng)的子宮頸上皮細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔子宮頸上皮細(xì)胞采用膠原酶消化法，結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的tu子宮頸上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中，移入生物安全柜，
2) 從胸部解剖乳鼠，取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中，盡可能的除去結(jié)締組織等，
3) 取肺邊緣部分，剪碎，將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中，倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中，
4) 2h后，培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基，小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱，確保組織塊不會(huì)飄起來，
5) 每3d換液2mL，待細(xì)胞從組織塊中爬出來后，隔2d換液，待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時(shí)，去除組織塊，將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。
大鼠嗅球神經(jīng)干細(xì)胞 | 大鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞 |
大鼠杏仁核神經(jīng)元細(xì)胞 | 豬偽狂犬/豬圓環(huán)2型/高致病性豬藍(lán)耳病病毒（PRV-gB/PCV-2/PRRSV-M）檢測(cè)試劑盒(三重?zé)晒釶CR法) |
大鼠角膜上皮細(xì)胞 | 豬藍(lán)耳病毒歐洲株/美洲株檢測(cè)試劑盒（雙重?zé)晒釶CR法） |
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大鼠晶狀體上皮細(xì)胞 | 豬瘟野毒株/非洲豬瘟病毒（CSFV-W/ASFV）檢測(cè)試劑盒（雙重?zé)晒釶CR法） |
大鼠結(jié)膜成纖維細(xì)胞 | 豬瘟野毒株/非洲豬瘟/高致病性豬藍(lán)耳病毒（CSFV-W/ASFV/PRRSV-M）檢測(cè)試劑盒（三重?zé)晒釶CR法） |
雜交瘤細(xì)胞；S-95-7 | 非洲豬瘟/高致病性豬藍(lán)耳病毒（ASFV/PRRSV-M）檢測(cè)試劑盒（雙重?zé)晒釶CR法） |
大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 豬瘟/豬藍(lán)耳病病毒病毒通用型/口蹄疫通用型/豬偽狂犬野毒株（CSFV/PRRSV-U/FMDV-U/PRV-gE）檢測(cè)試劑盒(四重?zé)晒釶CR法) |
大鼠脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞 | 豬傳染性胃腸炎/豬流行性腹瀉病毒/副豬嗜血桿(TGEV/PEDV/HPS)檢測(cè)試劑盒(三重?zé)晒釶CR法) |
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 犬細(xì)小病毒/犬瘟熱病毒(CPV/CDV)檢測(cè)試劑盒(雙重?zé)晒釶CR法) |
大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞 | 豬瘟病毒/豬藍(lán)耳病毒通用型/口蹄疫病毒通用型/豬圓環(huán)病毒2型（CSFV/PRRSV-U/FMDV-U/PCV-2）檢測(cè)試劑盒(四重?zé)晒釶CR法) |
大鼠牙周膜干細(xì)胞 | 原代兔子宮頸上皮細(xì)胞病豬藍(lán)耳高致病/NADC-30株（PRRSV-M/PRRSV-NADC30）檢測(cè)試劑盒（雙重?zé)晒釶CR法） |
大鼠牙髓干細(xì)胞 | 流感病毒H7/新城疫病毒（AIV-H7/NDV）檢測(cè)試劑盒 (雙重?zé)晒釶CR法) |
肺炎支原體(MP)檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) | 流感病毒H5/H9亞型（AIV-H5/H9）檢測(cè)試劑盒 (雙重?zé)晒釶CR法) |
1、您收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作：
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時(shí)或過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2、細(xì)胞傳代：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）棄上清，沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細(xì)胞貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細(xì)胞凍存：
1）細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2）添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，再加入培養(yǎng)液終止消化，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1500rpm/min，離心5min；
3）用適當(dāng)量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存管中無(wú)結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無(wú)菌離心管中，滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞，然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中；
3）放置于37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
