【儀表網(wǎng) 研發(fā)快訊】免疫層析技術(shù)(ICA)作為一種基于固相層析原理的檢測(cè)方法，因其簡(jiǎn)便易行、快速高效且成本較低的特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于即時(shí)檢測(cè)(POCT)領(lǐng)域。經(jīng)典的基于金納米顆粒(AuNP)的比色I(xiàn)CA由于較低的靈敏度和有限的定量能力，限制了其在痕量檢測(cè)中的應(yīng)用。研究顯示，基于熒光的ICA表現(xiàn)出比傳統(tǒng)比色I(xiàn)CA更高的靈敏度。然而，傳統(tǒng)熒光材料通常具有聚集淬滅效應(yīng)，由于形成分子間二聚體和π−π堆疊，當(dāng)它們聚集時(shí)熒光信號(hào)減弱，致使傳統(tǒng)的熒光ICA的實(shí)際檢測(cè)范圍通常只能達(dá)到10-100 ng/mL。
 

　　近期，蘇州醫(yī)工所尹煥才團(tuán)隊(duì)與白鵬利團(tuán)隊(duì)合作，提出將新興的光致發(fā)光材料，鈣鈦礦量子點(diǎn)(CsPbX3)，替代傳統(tǒng)的膠體金納米顆粒，建立新型的定量熒光免疫層析方法。通過(guò)原位結(jié)晶生長(zhǎng)和水輔助策略合成了具有雙重保護(hù)的水穩(wěn)定的CsPbX3-MSN納米復(fù)合材料(CsM-H)。利用羧基修飾的CsM-H納米復(fù)合材料通過(guò)活化酯法偶聯(lián)食品過(guò)敏原單克隆抗體，構(gòu)建了雙模式熒光免疫層析檢測(cè)方法(FICA)，用于測(cè)定食品基質(zhì)中的小麥醇溶蛋白。與傳統(tǒng)的比色及熒光層析試紙條相比，基于CsM-H的FICA顯示出更高的靈敏度(比傳統(tǒng)膠體金和時(shí)間分辨熒光微球的ICA靈敏度分別提升10倍和5倍)，且在0-100 ng/mL濃度范圍區(qū)間具有良好的線性關(guān)系(R2=0.989)。超穩(wěn)定的CsM-H納米復(fù)合材料使FICA試紙條具有優(yōu)異的穩(wěn)定性，可在室溫下保存長(zhǎng)達(dá)六個(gè)月，同時(shí)FICA表現(xiàn)出優(yōu)異的特異性(交叉反應(yīng)試驗(yàn)CR<1%)。高穩(wěn)定性的鈣鈦礦納米復(fù)合材料顯著提高了ICA的靈敏度和定量檢測(cè)能力，基于FICA的高靈敏免疫傳感器為生物安全、食品安全、環(huán)境監(jiān)測(cè)以及臨床診斷等多個(gè)領(lǐng)域提供了廣闊的應(yīng)用前景。
 

圖1 新型熒光免疫層析傳感器示意圖及檢測(cè)原理
 

圖2 雙重保護(hù)的鈣鈦礦量子點(diǎn)透射電鏡圖及性能表征
 

　　圖3 基于鈣鈦礦量子點(diǎn)的定量熒光免疫層析方法檢測(cè)過(guò)敏原蛋白的性能(靈敏度、特異性、穩(wěn)定性)表征
 

　　相關(guān)研究成果以“In-situ growth of highly stable CsPbBr3@MSN@PbBr(OH) through water-assisted strategy for high sensitivity immunochromatographic assay”為題，發(fā)表于Chemical Engineering Journal期刊(中科院一區(qū)，影響因子13.3)。蘇州醫(yī)工所劉杰博士后、顧桐旭副研究員為論文第一作者，白鵬利研究員、尹煥才研究員為論文通訊作者。本研究得到蘇州市基礎(chǔ)研究項(xiàng)目、國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目和中國(guó)科學(xué)院青年創(chuàng)新促進(jìn)會(huì)項(xiàng)目的資助。