本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）水平。用純化的大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP），再與HRP標(biāo)記的心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）濃度。

大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）ELISA試劑盒

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

800pg/ml	5號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
400pg/ml	4號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
200pg/ml	3號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
100pg/ml	2號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
50pg/ml	1號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：

人*酶（Arg）ELISA試劑盒 96T48T
人金屬硫蛋白（MT）ELISA試劑盒 96T48T
人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3（AFP-L3）ELISA試劑盒 96T48T
人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2（AFP-L2）ELISA試劑盒 96T48T
人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1（AFP-L1）ELISA試劑盒 96T48T
人低密度脂蛋白（LDL）ELISA試劑盒 96T48T
人肌球蛋白輕鏈（MLC）ELISA試劑盒 96T48T
人α-輔肌動蛋白3（ACTN-3）ELISA試劑盒 96T48T
人抗肌動蛋白抗體（AAA）ELISA試劑盒 96T48T
人雷帕霉素靶蛋白（mTOR）ELISA試劑盒 96T48T
人核基質(zhì)蛋白22（NMP-22）ELISA試劑盒 96T48T
人堿性胎兒蛋白（BFP）ELISA試劑盒 96T48T
人寡聚蛋白（oligomeric）ELISA試劑盒 96T48T
人高分子量細胞角蛋白（CK-HMW）ELISA試劑盒 96T48T

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大鼠心型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）ELISA試劑盒

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