偶聯(lián)ELISA試劑盒與親和素和*
一、親合素主要包括卵白親合素、鏈親合素、卵黃親合素及類親合素等。后兩種因其特異性親合力低，研究不多，前兩種目前已深入研究并得到廣泛應(yīng)用。
    親合素又稱卵白素或抗*，分子量為68000，pI 10～10.5；在pH9～13緩沖液中性質(zhì)均穩(wěn)定，耐熱并耐多種蛋白水解酶的作用。天然親合素為堿性蛋白，由4個(gè)相同的亞單位構(gòu)成4聚體；每個(gè)親合素亞單位通過其結(jié)構(gòu)中的*殘基與*中的Ureido環(huán)（I環(huán)）結(jié)合。因此，1個(gè)親合素分子存在4個(gè)與*分子結(jié)合位點(diǎn)，其結(jié)合常數(shù)（Ka）高 達(dá)1015mol/L。通常，親合素的活性單位是以親合素結(jié)合*的量來表示的，即以能結(jié)合1ug*所需要的親合素量為1個(gè)親合素活性單位。一般1ug親合素約含13～15個(gè)活性單位。
二、*又稱維生素H，分子量244.31，存在于蛋黃中。用化學(xué)方法制成的衍生物，*-羥基琥珀亞胺酯（BNHS）可與蛋白質(zhì)、糖類和酶等多種類型的大小分子形成*醫(yī)學(xué)教育網(wǎng)整理化的產(chǎn)物。親和素與*的結(jié)合，雖不屬免疫反應(yīng)，但特異性強(qiáng)，親和力大，兩者一經(jīng)結(jié)合就極為穩(wěn)定。由于1個(gè)親和素分子有4個(gè)*分子的結(jié)合位置，可以連接更多的*化的分子，形成一種類似晶格的復(fù)合體。因此把親和素和*與ELISA試劑盒偶聯(lián)起來，就可大大提高ELISA試劑盒的敏感度。
    親和素-*系統(tǒng)在ELISA試劑盒中的應(yīng)用有多種形式，可用于間接包被，亦可用于終反應(yīng)放大?？梢栽诠滔嗌舷阮A(yù)包被親和素，原用吸附法包被固相的抗體或抗原與*結(jié)合，通過親和素-*反應(yīng)而使*化的抗體或抗在相化。這種包被法不僅可增加吸附的抗體或抗原量，而且使其結(jié)合點(diǎn)充分暴露。另外，在常規(guī)ELISA試劑盒中的酶標(biāo)抗體也可用*化的抗體替代，然后連接親和素-酶結(jié)合物，以放大反應(yīng)信號(hào)。
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