目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯待塑料對蛋白質(zhì)的吸附作用是普遍性的。因此在雞ELISA試劑盒測定的反應(yīng)過程中應(yīng)盡量避免非特異性吸附，而在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。在標(biāo)本和結(jié)合物的稀釋液和洗滌液中加入聚山梨酯（吐溫，Tween）一類物質(zhì)即右達(dá)到此目的。使用前應(yīng)觀察是否變質(zhì)。蒸餾水的質(zhì)量在ELISA試劑盒中也至關(guān)重要，使用新鮮重蒸餾的。不合格的蒸餾水可使空白值升高。
測定的實施中，應(yīng)力求各個步驟操作的標(biāo)準(zhǔn)化，下面以板式ELISA試劑盒為例。

雞ELISA試劑盒介紹有關(guān)注意事項
1. 用方陣法滴定選擇各反應(yīng)物zui適工作濃度；
2. 將100μlRAMIG溶液包被聚苯乙烯反應(yīng)板微孔，4℃濕盒，12h；
3. 棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗滌3次，甩干；
4. 加入100μl抗激素Mab溶液，37℃70min；
5. 棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗滌3次，甩干；
6. 各孔內(nèi)依次加入50μl待測樣液，每個樣品3次重復(fù)，15～20℃，20min；
7. 加入50μlHRP標(biāo)記激素，37℃，60min；
8. 棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗滌3次，甩干；

    其結(jié)果可用目測或用分光光度計定量測定，雞ELISA試劑盒本法用不同種抗原包被固相載體后，只要用一種酶標(biāo)記抗人球蛋白，即可作多種人的傳染病、寄生蟲病以及其他疾病的血清學(xué)診斷。如用酶標(biāo)記抗人IgM,則可用于早期診斷。