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低轉(zhuǎn)移肺癌細胞

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更新時間:2016-10-30 23:38:59瀏覽次數(shù):269次

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【細胞凍存】將貼壁細胞消化后離心收集,懸浮細胞直接離心收集,以*培養(yǎng)基或胎牛血清重懸細胞至終濃度約106/ml。加入10%的DMSO。以每管1~2ml分裝至凍存管中。用絕熱材料包裹置-70攝氏度冰箱冷凍過夜。次日低轉(zhuǎn)移肺癌細胞保存到液氮中。
A05914 大鼠孕酮受體(PGR)ELISA Kit,48T/96T
A05915 蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原(Vtg)ELISA Kit,48T/96T
A05916 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA Kit,48T/96T ,
A05917 貓漢賽巴通體(CBH)ELISA Kit,48T/96T
A05918 人可溶性CD146分子(sCD146)ELISA Kit,48T/96T
A05919 大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA Kit,48T/96T
A05920 大鼠*釋放激素受體(GnRHR)ELISA Kit,48T/96T
【細胞株傳代】貼壁細胞:對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據(jù)經(jīng)驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒灐?
懸浮細胞:一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之,*MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始,各種目的無血清培養(yǎng)*AIM V(12005)培養(yǎng)基(SFM)。
L-*在細胞培養(yǎng)中重要嗎?它在溶液中不穩(wěn)定嗎?
L-*在細胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后,L-*可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-*在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解,但是確切的降解率一直沒有zui終定論。L-*的降解導致氨的形成,而氨對于一些細胞具有毒性。
GlutaMAX-I是什么?培養(yǎng)細胞如何利用GlutaMAX-I?這個二肽有多穩(wěn)定?
GlutaMAX-I 二肽是一個L-*的衍生物,其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-*來保護。一種肽酶逐漸裂解二肽,釋放L-*供利用。
GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定,即使在121磅滅菌20分鐘,GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,如果在相同條件下,L-*幾乎*降解。
什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅?
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑:中性時為紅色,酸性時為黃色,堿性時為紫色。研究表明,酚紅可以模擬固醇類激素的作用,(特別是雌激素)。為避免固醇類反應,培養(yǎng)細胞,尤其是哺乳類細胞時,用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測,一些研究人員在做流式細胞檢測時,不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。
如何用臺盼蘭計數(shù)活細胞?
用無血清培養(yǎng)基把細胞懸液稀釋到200~2000個/毫升,在0.1毫升的細胞懸液中加入0.1毫升的0.4%的臺盼蘭溶液。輕輕混勻,數(shù)分鐘后,用血球計數(shù)板計數(shù)細胞?;罴毎懦馀_盼蘭,因而染成藍色的細胞是死細胞。
A05898 大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA Kit,48T/96T
A05899 大鼠總膽汁酸(TBA)ELISA Kit,48T/96T
A05900 大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)ELISA Kit,48T/96T
A05901 人蛋白(肽酰脯氨酰順/反異構(gòu)酶)NIMA結(jié)合1(PIN1)ELISA Kit,48T/96T
A05902 大鼠脂酰*合成酶(ACS)ELISA Kit,48T/96T
A05903 大鼠檸檬酸合酶(CS)ELISA Kit,48T/96T
A05904 大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素(GC)ELISA Kit,48T/96T
A05905 豬傳染性胃腸炎病毒抗體(TGEV)ELISA Kit,48T/96T
A05906 大鼠磷酸化乙酰*羧化酶(pACCase)ELISA Kit,48T/96T
A05907 人抗突觸前膜抗體(PsmAb)ELISA Kit,48T/96T
A05908 豬流行性腹瀉病毒抗體(PEDV)ELISA Kit,48T/96T
A05909 人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)ELISA Kit,48T/96T
A05910 小鼠巨噬細胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)ELISA Kit,48T/96T
A05911 豬白介素12(IL-12/P40)ELISA Kit,48T/96T
A05912 小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)ELISA Kit,48T/96T
A05913 人*1(KLK 1)ELISA Kit,48T/96T
 

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