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你都清楚ELISA實驗的這三條基本原理嗎?

時間:2017-10-20閱讀:164
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ELISA試劑盒是免疫確診中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的盛行癥、寄生蟲病及非盛行癥等方面的免疫確診。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)現(xiàn)已運用的作用,認(rèn)為ELISA法具有活絡(luò)、特異、簡略、快速、安穩(wěn)及易于自動化操作等特點。不只適用于標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標(biāo)本,因此,也適合于血清盛行學(xué)查詢。本法不只可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種前期確診的出色方法。
1、抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分彼此吸附,并堅持其免疫學(xué)活性;
2、抗原或抗體可通過共價鍵與酶銜接構(gòu)成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能堅持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;
3、酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)參與底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯現(xiàn)試驗作用。
 由于ELISA試劑盒一方面是建立在抗原與抗體免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上,因此,具有特異性。而另一方面又由于酶符號抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結(jié)合物,它可以催化底物分子發(fā)作反應(yīng),發(fā)作擴(kuò)展作用,正由于此種擴(kuò)展作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA試劑盒是一種既敏感又特異的方法。
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