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選用ELISA來(lái)定量測(cè)定結(jié)合的噬菌體

時(shí)間:2017-11-10閱讀:183
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洗刷緩沖液
辣根過(guò)氧化物酶(HRP)連接的抗M13單克隆抗體(mAb)   
HRP底物㈠OPD(鄰苯二胺,o-phe-nylenediamine)或ATBS  【2,2-連氮基-雙-(3-乙基苯并噻吡咯啉-6-磺 酸),2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazo-line-6-sulfonic acid)】
預(yù)先預(yù)備的噬菌體包被的微孔板
結(jié)合緩沖液
[辦法]
1,每塊板用洗刷緩沖液洗刷3次。
2.用結(jié)合緩沖液將HRP聯(lián)結(jié)的抗M13單克隆抗體做1:5000稀釋?zhuān)靠讌⒓?00ul,室溫下孵育30分鐘。
3.每塊板用洗刷緩沖液洗刷3次。
4.每孔參加lOOglOPD顯色,不超越15分鐘后用50ul 2.5mol/L的HzS04停止反響。5.檢測(cè)每塊板在492nm處的吸光度。

 

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