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人雌激素受體(ER)elisa分析檢測試劑盒技術(shù)原理

時間:2017/2/27閱讀:519
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人雌激素受體(ER)elisa分析檢測試劑盒技術(shù)原理:
(1)抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
(2)結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
(3)酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
(4)受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5)此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6)加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術(shù)。組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
人雌激素受體(ER)elisa分析檢測試劑盒標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
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