elisa檢測試劑盒試驗中經(jīng)常遇到的問題及處理方案
制備過程中應(yīng)注意的問題:
1.細(xì)菌的生長狀態(tài)：實驗中應(yīng)密切注視細(xì)菌的生長狀態(tài)和密度，盡量使用對數(shù)生長期的細(xì)胞（一般通過檢測OD600來控制。DH5?菌株OD600為0.5時細(xì)胞密度是5×107/ml）；
2.所有操作均應(yīng)在無菌條件和冰上進(jìn)行；
3.經(jīng)CaCl2處理的細(xì)胞，在低溫條件下，一定的時間內(nèi)轉(zhuǎn)化率隨時間的推移而增加，24小時達(dá)到zui高，之后轉(zhuǎn)化率再下降（這是由于總的活菌數(shù)隨時間延長而減少造成的）；
4.化合物及無機(jī)離子的影響：在Ca2+的基礎(chǔ)上聯(lián)合其他二價金屬離子（如Mn2+或Co2+）、DMSO或還原劑等物質(zhì)處理細(xì)菌，可使轉(zhuǎn)化效率大大提高（100-1000倍）；
5.所使用的器皿必須干凈。跡量的去污劑或其它化學(xué)物質(zhì)的存在可能大大降低細(xì)菌的轉(zhuǎn)化效率；
6.質(zhì)粒的大小及構(gòu)型的影響：用于轉(zhuǎn)化的應(yīng)主要是超螺旋的DNA；
7.一定范圍內(nèi)，轉(zhuǎn)化效率與外源DNA的濃度呈正比；
工作原理：
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，計算樣品濃度。
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Smad同源物4(Smad4)ELISA試劑盒    ，英文名：    Smad4 ELISA Kit
Smad同源物3(Smad3)ELISA試劑盒    ，英文名：    Smad3 ELISA Kit
Smad同源物1(Smad1)ELISA試劑盒    ，英文名：    Smad1 ELISA Kit
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Slit同源物1(Slit1)ELISA試劑盒    ，英文名：    Slit1 ELISA Kit
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