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RNA提取注意事項

時間:2021/9/29閱讀:1607
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樣品的采集和保存:

RNA提取為目的的樣品,在采樣時就要根據(jù)RNA提取的實驗設(shè)計進(jìn)行分裝,在RNAlater中保存 (推薦QIAGEN生產(chǎn)的),4℃運輸并過夜,以保證RNAlater充分與樣品細(xì)胞結(jié)合,從而完成RNA的固定,之后轉(zhuǎn)入-20℃保存,如需長期保存 (幾個月以上),應(yīng)當(dāng)在-80℃下保存。

提取過程中的注意事項:

1. 所有實驗所用的槍頭、離心管等消耗品均要使用RNase-free的;

2.整個過程要在無RNase污染的條件下進(jìn)行,通常可以在無菌操作臺中進(jìn)行實驗,并用75%的酒精進(jìn)行擦拭殺菌,如有必要也可在實驗前噴灑一些商用的RNase抑制劑;

3.所有相關(guān)溶液的配制要使用RNase-free水或DEPC水 (包括75%酒精也需要用無水乙醇與DEPC水配制);

4.溶液的配制使用移液器進(jìn)行操作,切勿使用量筒等中間器皿;

研5.缽、研棒、鑷子、剪刀等用錫箔紙包好后,200℃干熱滅菌4h;

6. 實驗過程中一定要戴手套和口罩;

7.異丙醇、、乙醇等試劑要使用未開封的,或者開封之后直接分裝至小容量離心管的,以避免多次使用的交叉污染;

1:現(xiàn)在一般實驗室都使用從公司直接購買的RNase-free水,這種水通常都是大包裝,比如100mL一瓶,在第一次使用的時候,開蓋后一定要將其分裝到1.5或2mL RNase-free離心管中,在冰箱中保存,每次實驗用多少取多少,避免多次實驗的交叉污染。

2:一定要戴口罩!?。〔灰侣闊?,因為你真沒法保證實驗過程中不打噴嚏?。?!


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