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抗原抗體反應(yīng)影響因素詳述

時(shí)間:2023/10/8閱讀:870
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一、反應(yīng)物自身的因素

1.抗體:

不同來源的抗體,反應(yīng)性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應(yīng),為提高試驗(yàn)的可靠性,應(yīng)選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑。等價(jià)帶的寬窄也影響抗原抗體復(fù)合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應(yīng)。

2.抗原:

抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數(shù)目均可影響反應(yīng)結(jié)果。顆粒性抗原出現(xiàn)凝集反應(yīng),可溶性抗原出現(xiàn)沉淀反應(yīng),單價(jià)抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合不出現(xiàn)沉淀現(xiàn)象。

二、反應(yīng)環(huán)境條件

1.電解質(zhì):

抗原與抗體發(fā)生特異性結(jié)合后,雖由親水膠體變?yōu)槭杷z體,若溶液中無電解質(zhì)參加,仍不出現(xiàn)可見反應(yīng)。為了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液。

2.酸堿度:

抗原抗體反應(yīng)必須在合適的pH環(huán)境中進(jìn)行。蛋白質(zhì)具有兩性電離性質(zhì),因此每種蛋白質(zhì)都有固定的等電點(diǎn)??乖贵w反應(yīng)一般在pH6~9進(jìn)行,有補(bǔ)體參與的反應(yīng)pH為7.2~7.4,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應(yīng)。

3.溫度:

在一定范圍內(nèi),溫度升高可加速分子運(yùn)動(dòng),抗原與抗體碰撞機(jī)會(huì)增多,使反應(yīng)加速。一般為15℃~40℃,常用的抗原抗體反應(yīng)溫度為37℃,溫度如高于56℃,可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞。每種試驗(yàn)都有其獨(dú)te的最適反應(yīng)溫度要求。此外,適當(dāng)振蕩也可促進(jìn)抗原抗體分子的接觸,加速反應(yīng)。


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