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抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
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詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 磷酸化內(nèi)收蛋白抗體 |
英文名稱 | phospho-alpha Adducin (Thr445) |
貨號 | BJ-K6767 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
Ubiquitin/UBC/UBB 泛素蛋白α-輔肌動蛋白4(內(nèi)參)Leptin Fragme 116-130 Amide mouseMouse GCK (Glucokinase) 檢測試劑盒
USP1 泛素特異性蛋白酶1堿性磷酸酶1,3-雙(2,6-二異基)咪唑啉酮-2-亞基Mouse gp130 (Glucoprotein 130) 檢測試劑盒
VAMP-1/Synaptobrevin-1 VAMP1囊泡相關(guān)膜蛋白1AU1 tag標簽1,3-雙(2,6-二異基)咪唑啉酮-2-亞基Mouse G6PD (Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase) 檢測試劑盒
VAMP-2 囊泡相關(guān)膜蛋白2脂肪細胞增強結(jié)合蛋白14-氨基-2,6-二氯吡啶Mouse GLUT2 (Glucose Transporter 2) 檢測試劑盒
VAMP-3 囊泡相關(guān)膜蛋白3蛋白激酶B4-氨基-2,6-二氯吡啶Mouse GLUT3 (Glucose Transporter 3) 檢測試劑盒
VAP1 血管粘附蛋白1蛋白激酶B1-甲酰哌啶Mouse GLUT4 (Glucose Transporter 4) 檢測試劑盒
VASH1 血管抑制蛋白1血管生成素樣蛋白21-甲酰哌啶Mouse GPI (Glucose 6 Phosphate Isomerase) 檢測試劑盒
VHL/HRCA1 VHL腫瘤抑制因子血管生成素3/血管生成素41-甲酰哌啶Mouse GUSb (Glucuronidase, Beta) 檢測試劑盒
葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白Monkey α-GST (α-glutathione S-transferases) 檢測試劑盒
GTP結(jié)合蛋白10Monkey F10 (Coagulation Factor X) 檢測試劑盒
磷酸化Ras GTP酶活化蛋白結(jié)合蛋白1Monkey TGF-α (Transforming Growth Factor α) 檢測試劑盒
Ras GTP酶活化蛋白結(jié)合蛋白1Monkey SOD3 (Superoxide Dismutase 3, Extracellular) 檢測試劑盒
γ氨基丁酸γ2受體/GABAA Rγ2Monkey CFTR (Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator) 檢測試劑盒
磷酸化糖原合酶激酶3βMonkey GasR (Gastrin Receptor) 檢測試劑盒
磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1Monkey GP6 (Glycoprotein VI, Plaet) 檢測試劑盒
磷酸化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1Monkey LHRH/GnRH (Luteinizing Hormone Releasing Hormone) 檢測試劑盒
磷酸化內(nèi)收蛋白抗體Escherichia│coli分離基物: 尿提供形式: 凍干物安全等級: 2模式株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 36℃-80℃冰箱凍結(jié)法
Nigrospora│sp.分離基物: 華山松皰銹病感病植株樹皮提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no制酒精。培養(yǎng)基: CM0013生長條件: 25-28℃真空冷凍干燥法
新疆糖單孢種屬: Saccharomonospora│xinjiangensis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: yes模式株培養(yǎng)基: 0234生長條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Leinula│edodes分離基物: 殼斗科倒木提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no可作香菇種質(zhì)資源保護利用、系統(tǒng)發(fā)育學(xué)和生物地理學(xué)研究。培養(yǎng)基: 14生長條件: 25℃定期移植法
Aspergillus│sp.分離基物: 水樣/下層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式株: no大洋絲狀真培養(yǎng)基: 475生長條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Klebsiella│pneumoniae提供形式: 凍干物;凍結(jié)物模式株: no培養(yǎng)基: 820生長條件: 22℃-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bacillus│altitudinis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 820生長條件: 29℃真空冷凍干燥法
Penicillium│chrysogenum分離基物: 水樣/深層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式株: no研究培養(yǎng)基: 475生長條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
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