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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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弗氏鏈霉菌保存

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-12-01 12:53:18瀏覽次數(shù):262次

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弗氏鏈霉菌保存低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。

規(guī)格參數(shù):
資源名稱  弗氏鏈霉菌保存
種屬: Streptomyces│fradiae

提供形式: 凍干物

安全等級(jí): 1

模式菌株: no

培養(yǎng)基: 0012

生長(zhǎng)條件: 28℃

存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

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儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法:
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ:Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃,15min。
傳代方法 ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。 ②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長(zhǎng)條件 30℃,好氧
存儲(chǔ)條件 2-8℃冷藏
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,產(chǎn)品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法長(zhǎng)期保存。
基本概念:
(1)菌群:由多種細(xì)菌混合組成的相對(duì)穩(wěn)定的細(xì)菌群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上一級(jí)分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí),菌種是指細(xì)菌的種子(用來長(zhǎng)期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同細(xì)菌,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(100×)猴頭注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

RPMI-1640(ATCC改良)Frigoribacterium拉丁屬名: Frigoribacterium   sp/

B-27無血清添加劑,50×大腸桿菌拉丁屬名: Escherichia coli

重組人胰島素溶液(10mg/mL)枯草芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis

胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒-X添加劑(100×)菊異莖點(diǎn)霉拉丁屬名: Paraphoma chrysanthemicola

G-5添加劑(100×)蒼黃鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces lilacinus

N-2添加劑(100×)假單孢菌用途: 能于30℃、48小時(shí)降解約30%濃度為200ppm的甲酸,甲酸為碳源(無機(jī)鹽培養(yǎng)基)

人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia coli

兔羊膜胚胎細(xì)胞*培養(yǎng)基三葉草根瘤菌用途: 與三葉草共生固氮

胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒-G添加劑(100×)委內(nèi)瑞拉鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces venezuelae

兔臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞*培養(yǎng)基紅色紅曲菌 拉丁屬名: Monascus ruber

兔軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基冬蟲夏草拉丁屬名: Ophiocordyceps  sinensis

兔臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基莫哈韋芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

胰島素-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒-A添加劑(100×)海洋桿菌拉丁屬名: Pontibacter sp.

大鼠脊髓神經(jīng)干細(xì)胞*培養(yǎng)基暗孢節(jié)菱孢注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用

兔角膜內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基鴨艾美耳球蟲拉丁屬名: anatis
曲安西龍雙醋酯標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:350mg  英文名稱:Triamcilone Diacetate

維拉帕米相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:50mg  英文名稱:

醋膚輕松標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:100mg  英文名稱:Fluocilone Acetonide

甲酰甲標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Methylsulfonylmethane

二甲基亞砜標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:3g  英文名稱:Dimethyl Sulfoxide

  規(guī)格:1.5ml×3ampules  英文名稱:Acetone

2標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:1.2ml×3ampules  英文名稱:2Propal

甲標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:3x1.5ml  英文名稱:Methyl Alcohol

鹽哌甲酯E異構(gòu)體溶液標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:0.5ml  英文名稱:

膽標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:200mg  英文名稱:Choline Chloride

D(+)木糖  *  英文名稱:DXylulose  含量:高純,98%

D(+)山梨糖  *  英文名稱:D(+)Sorbose  含量:AR

D(+)松二糖  *  英文名稱:D(+)Turase  含量:BR

D(+)松三糖一水合物  *  英文名稱:D(+)Melezitosemohydrate  含量:BR,97%,β型

D2氨基3(4咪基)  *  英文名稱:DHistidine  含量:BR,99%

D2氨基3基  *  英文名稱:DPhenylalanine  含量:BR,99%

D2氨基3甲基  *  英文名稱:DValine  含量:BR,99%

D2氨基5胍基  *  英文名稱:DArginine  含量:BR,99%

D2氨基  *  英文名稱:DAlanine  含量:BR,99%

D2氨基  *  英文名稱:Drvaline  含量:BR,99%
弗氏鏈霉菌保存PUC19質(zhì)粒PUC19質(zhì)粒25克超純,98%

12673-67-5帕拉派克 RPORAPAK R (100-120 MESH ASTM) FOR GC

Z-D-alanineN-CBZ-D-丙酸25克特純,98%

2,4,6-三苯酚 2,4,6-Trichlorophenol,98% 1988-6-2 100G 通用試劑

化十六烷基/代十六烷基/十六烷基基/化鯨蠟基/西吡銨/Hexadecylpyridinium chloride CP,99%, 100克 國(guó)產(chǎn)

TG-SDS-BUFFER,10XREADY-PACKTG-SDS緩沖液, 干粉蛋白組學(xué)級(jí)白色粉末RTsigma

培養(yǎng)基Egg yolk emulsion sterilNA

BEEFEXTRACTPOWDER牛肉浸粉高純級(jí)棕黃色至褐色粉末RT不sigma

對(duì)溴苯酚 4-Bromophbenol,99% 106-41-2 25G 通用試劑

化鉻/三化鉻/六水化鉻/Chromic chloride AR,99%, 500克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長(zhǎng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,產(chǎn)品僅用于科研可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。

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