我們知道,在進(jìn)口原裝elisa試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會,只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。
我公司技術(shù)員說到:這是一個逐步平衡的過程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時間的溫育。
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時,實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時,產(chǎn)物的生成可達(dá)。
為加速反應(yīng),可提高反應(yīng)的溫度,有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行,但不宜采用更高的溫度??乖贵w反應(yīng)4℃更為*,在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中放置一晚,以形成多的沉淀。但因所需時間太長,在ELISA中一般不予采用。
若用保溫箱,進(jìn)口原裝elisa試劑盒板應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應(yīng)如此。無論是水浴還是濕盒溫育,反應(yīng)板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。
唾液酸轉(zhuǎn)移酶1/α-2,6唾液酸轉(zhuǎn)移酶 大鼠視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)
唾液酸轉(zhuǎn)移酶1/α-2,6唾液酸轉(zhuǎn)移酶IgG 大鼠視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)
蛙皮素受體3IgG 大鼠生長抑素(SS)
外毛細(xì)胞運(yùn)動蛋白/可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白Slc26a5IgG 大鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)
外胚層發(fā)育不良IgG 大鼠生長激素釋放多肽(GHRP)
外周蛋白IgG 大鼠生長激素(GH)
外周髓磷脂P0蛋白/P0蛋白IgG 大鼠腎損傷分子1(Kim-1)
外周髓鞘蛋白-22IgG 大鼠腎素(Renin)
晚期糖基化終末產(chǎn)物IgG 大鼠腎上腺髓質(zhì)素(ADM)
進(jìn)口原裝elisa試劑盒
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