我司為客戶(hù)分析Elisa試劑盒操作問(wèn)題：

一、細(xì)胞上清液樣本如何處理？

    答：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(1000×g)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心10分鐘左右(5000×g)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

二、為什么有的試劑盒是采用競(jìng)爭(zhēng)Elisa法？

    答：小分子抗原或半抗原因?yàn)槿狈勺鲓A心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn)，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定，可以采用競(jìng)爭(zhēng)法。其原理是標(biāo)本中的抗原和固相載體上的抗原競(jìng)爭(zhēng)生物素化抗體上的結(jié)合位點(diǎn)，標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的生物素化抗體愈少，后的顯色也愈淺，即顯色深淺與樣本中的抗原濃度成反比。小分子激素、藥物等Elisa測(cè)定多用此法。

三、用什么軟件處理Elisa檢測(cè)的數(shù)據(jù)比較好？

    答：Elisa標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合可以應(yīng)用Curve Expert軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。它使用非常方便，可以生成漂亮的曲線應(yīng)用到論文之中。