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原代小鼠肺成纖維細(xì)胞

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elisa檢測試劑盒
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科研細(xì)胞
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
組織來源 肺組織 貨號 GOY-01X0704
產(chǎn)品規(guī)格 5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁 用途 僅供科研研究實驗
原代小鼠肺成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:CoCM-1結(jié)腸癌Duck embryo鴨胚胎成纖維細(xì)胞F81貓腎細(xì)胞LMH雞肝癌細(xì)胞MDBK牛腎細(xì)胞MDCK狗腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞OAR-L1綿羊肺成纖維細(xì)胞(原代永生化)pac2斑馬魚胚胎成纖維細(xì)胞人皮膚黑色細(xì)胞株HPF人肺成纖維細(xì)胞

原代小鼠肺成纖維細(xì)胞


產(chǎn)品名稱

原代小鼠肺成纖維細(xì)胞

英文名稱

Mouse Lung Fibroblast Cells

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0704

組織來源

肺組織

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3-5代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

 


原代小鼠肺成纖維細(xì)胞

原代小鼠肺成纖維細(xì)胞

細(xì)胞簡介:

小鼠肺成纖維分離自肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來;成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁wan全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺成纖維細(xì)胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持肺器官的正常形態(tài),合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。
方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠肺成纖維采用yi蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的小鼠肺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 


原代小鼠肺成纖維細(xì)胞

原代小鼠肺成纖維細(xì)胞

1) 將5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,

2) 從胸部解剖乳鼠,取出雙肺置于預(yù)冷的PBS中,盡可能的除去結(jié)締組織等,

3) 取肺邊緣部分,剪碎,將組織塊移入T25培養(yǎng)瓶中,倒置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中,

4) 2h后,培養(yǎng)瓶中注入2 mL內(nèi)皮培養(yǎng)基,小心將培養(yǎng)瓶正置于培養(yǎng)箱,確保組織塊不會飄起來,

5) 每3d換液2mL,待細(xì)胞從組織塊中爬出來后,隔2d換液,待細(xì)胞融合達(dá)到60-70%左右時,去除組織塊,將肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞重新鋪瓶。

原代小鼠肺成纖維細(xì)胞

草魚腎細(xì)胞;GIK

白鰱尾鰭細(xì)胞系;SCF

散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21

桃仁LAMP鑒定試劑盒

小鼠肝癌細(xì)胞;H22

天冬LAMP鑒定試劑盒

小鼠纖維肉瘤細(xì)胞;WEHI164

天麻LAMP鑒定試劑盒

鯉魚尾鰭細(xì)胞;YZ16

天花粉LAMP鑒定試劑盒

人前列腺癌細(xì)胞;PC-3[PC3]

天南星LAMP鑒定試劑盒

人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞;THP-1

葶藶子LAMP鑒定試劑盒

恒河猴肺細(xì)胞

通草LAMP鑒定試劑盒

大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E

檀香LAMP鑒定試劑盒

人宮頸癌上皮細(xì)胞;CaSki

太子參LAMP鑒定試劑盒

人纖維肉瘤細(xì)胞;HT-1080

鎖陽LAMP鑒定試劑盒

人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;RL95-2

酸棗仁LAMP鑒定試劑盒

人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;KLE

原代小鼠肺成纖維細(xì)胞絲瓜絡(luò)LAMP鑒定試劑盒

人乳頭狀卵巢腺癌細(xì)胞;Caov-3

熟地黃LAMP鑒定試劑盒

牛源性成分檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

首烏藤LAMP鑒定試劑盒


原代小鼠肺成纖維細(xì)胞

1、您收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作:

取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6小時或過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),然后換用新鮮培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。

2、細(xì)胞傳代:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)棄上清,沉淀細(xì)胞用12ml培養(yǎng)基重懸,然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代,放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)待細(xì)胞貼壁后,觀察培養(yǎng)結(jié)果,之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代。

3、細(xì)胞凍存:

1)細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2)添加0.125%消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;

3)用適當(dāng)量的凍存液(基礎(chǔ)培養(yǎng)基:FBS:DMSO=7:2:1)重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存。

4、細(xì)胞復(fù)蘇:

1)從液氮中取出細(xì)胞凍存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速將其置入37℃水浴中解凍,直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;

2)將凍存管中的細(xì)胞移至15ml無菌離心管中,滴加入培養(yǎng)液5ml混勻細(xì)胞,然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中;

3)放置于37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4)第二天,換用新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。


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