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技術(shù)文章

動物血清elisa試劑盒實驗技術(shù)有以下幾個要點

閱讀:161發(fā)布時間:2017-10-10

動物血清elisa試劑盒實驗技術(shù)有以下幾個要點:
1. 準備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等;
   
2. 根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量;
   
3. 按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑;
   
4. 標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備,盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者,注意低溫保存。
   
    實驗中為了確定信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應(yīng)包括在適當范圍內(nèi)的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。
   
    標準品的配制:對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書,注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),將凍干的細胞因子復(fù)溶。
   
    一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
   
    為了優(yōu)化靈敏度,建議過夜孵育標準品和標本。若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。當動物血清elisa試劑盒測定混合液體中的抗原時,如血清,建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。
250    Anaerobic Agar    用于厭氧菌分離培養(yǎng)    厭氧菌瓊脂    
250    CDC Anaerobic Agar    用于厭氧菌分離培養(yǎng)(Acumedia 方法)    CDC厭氧菌瓊脂    
250    Dextrose Meat Infusion Broth    用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng)(GB標準)    葡萄糖肉浸液肉湯        
100    Pick’s Broth BaseA    用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng) (GB標準)    匹克     匹克氏肉湯基礎(chǔ)A      
250    Meat Infusion Broth    用于溶血性鏈球菌、蠟樣芽孢桿菌和*的增菌培養(yǎng)(GB標準)    肉浸液肉湯培養(yǎng)基      
250    Azide Dextrose Broth    用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)    疊氮鈉葡萄糖肉湯      
250    Ethyl Violet Azide Broth    用于鏈球菌的增菌培養(yǎng)    乙基紫疊氮鈉肉湯      
        用于腸道菌的選擇性增菌培養(yǎng)(Alpha Biosciences方法)        
100    KF Streptococcus Agar    用于鏈球菌的選擇性分離及計數(shù)(SN標準)    KF鏈球菌瓊脂      
250    LIM Medium    用于鏈球菌的分離培養(yǎng)(Japan方法)    LIM培養(yǎng)基 
動物血清elisa試劑盒   

 


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