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動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒檢測結(jié)果不理想的原因是什么?

閱讀:646發(fā)布時(shí)間:2018-4-3

動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒的檢測結(jié)果不理想,不知道是哪里出了問題。幫我看下是什么原因,我自己合成8個(gè)氨基酸的抗原短肽,和BSA耦連后免疫動(dòng)物,1個(gè)月后用ELISA測定血清中針對(duì)抗原短肽的抗體滴度,具體步驟:用碳酸緩沖液溶解抗原短肽后包板,4度冰箱18小時(shí),再用1%OVA37度封閉2小時(shí),洗板3次。待測血清用10%小牛血清倍比稀釋,37度溫育1小時(shí),洗板3次,加入二抗,37度溫育40分鐘,洗板3次,加TMB顯色,結(jié)果比較詭異,陰性對(duì)照也顯色了,且OD值和陽性差別不大。是什么原因呢?是洗板的問題嗎?
   將問題轉(zhuǎn)至技術(shù)部,專業(yè)技術(shù)員回應(yīng),ELISA結(jié)果不理想原因可以根據(jù)這幾個(gè)方面分析:
    1.洗板是否串孔,如串孔的話可能造成污染;您一抗、二抗每次洗板時(shí)洗5遍以上。
    2.封閉液的問題,你說陰性對(duì)照也顯色了,那zui主要的問題應(yīng)該是封閉,應(yīng)重新考慮用OVA封閉是否適合,如果OVA封閉效果不好的話可以選擇其他的封閉液。封閉液的選擇園子里有很多相關(guān)的帖,你搜一下看看。
    3.建議動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒包被在37度兩小時(shí),這樣的效果可能會(huì)好一些。
含量測定(HPLC)    琥珀酸*    對(duì)照品    100827-200501        100mg
HPLC法含量測定    *    對(duì)照品    100828-200501        100mg
HPLC法含量測定    萘磺酸*    對(duì)照品    100829-200501        100mg
含量測定(HPLC)    *    對(duì)照品    100840-200501        100mg
溶出度檢查    *    對(duì)照品    100841-200501        100mg
含量測定(HPLC)    鹽酸*    對(duì)照品    100842-200501        100mg
HPLC法含量測定    鹽酸氟*    對(duì)照品    100844-200501        100mg
HPLC法含量測定    *    對(duì)照品    100845-200501        100mg
含量測定    異喹啉物    對(duì)照品    100846-200501        100mg
含量測定(內(nèi)標(biāo))    對(duì)羥基苯甲酸乙酯    對(duì)照品    100847-200501        100mg
動(dòng)物血清e(cuò)lisa試劑盒

 


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