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elisa試劑盒不同類型的樣本的處理方法

閱讀:263發(fā)布時間:2017-5-25

1、進口elisa試劑盒血清
血清是zui常用于ELISA檢測的一類樣本,處理也比較簡單。
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標本,將試管或離心管室溫放置2小時或4℃放置一晚,使血清析出。(將試管或離心管傾斜放置,使液面橫截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃ 1000×g離心20分鐘,仔細收集上清。建議將血清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
采血過程中應避免溶血,因為紅細胞裂解時會釋放具有過氧化酶活性的物質(zhì),在以HRP為標記的ELISA檢測中會有非特異性的顯色,而導致檢測的不準確性。同時也應避免細菌污染,因為菌體內(nèi)可能含有內(nèi)源性的HRP從而導致檢測的假陽性。
2、  血漿
用含抗凝劑的*或離心管采集血液標本,標本采集后30min內(nèi)4℃ 1000×g離心15min,取上清即血漿。將上清分裝多份,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
常用的抗凝劑為EDTA、*和*等,進口elisa試劑盒檢測時還應仔細閱讀試劑盒說明書,檢查試劑盒是否對抗凝劑有特殊要求。
3、  細胞培養(yǎng)上清
取細胞培養(yǎng)上清到離心管,1000×g離心20min,除去細胞碎片及雜質(zhì),取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。
4、  尿液、唾液等其他液體生物樣本
1000×g離心20min,取上清即可檢測。
總的來說,因為ELISA只能檢測可溶性蛋白的含量,所以應保證所有樣本均為澄清的液體,沉淀或懸浮物都應離心去除。
進口elisa試劑盒為了保證檢測的準確性,保存于-20℃或-80℃的樣本在1~6個月內(nèi)檢測;4℃保存的樣本應在1周內(nèi)進行檢測。另外,還應保證樣本不含NaN3,因為NaN3會抑制HRP的活性,從而導致假陰性的結(jié)果。


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