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閱讀:170發(fā)布時間:2017-6-7
導致ELISA試劑盒測定過錯成果的原因主要有三大要素:標本要素;試劑要素;操作要素。
ELISA試劑盒的基本原理使抗原(或抗體)結(jié)合到某種固相載體外表,并堅持其免疫活性;使抗原(或抗體)與某種酶聯(lián)結(jié)成酶標抗原(或抗體),并且此酶標抗原(或抗體)既保存其免疫活性,又保存其酶活性;測守時將受檢標本(抗體或抗原)和酶標抗原(或抗體)按不一樣過程與固相載體外表的抗原或抗體進行反響,再用洗刷辦法使固相載體上構(gòu)成的抗原抗體復合物與其它物質(zhì)分隔,zui終結(jié)合在固相載體上的酶量與標本中受檢的抗體或抗原量成必定份額;再加入酶反響底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a(chǎn)品,依據(jù)其顏色反響的深淺進行定性或定量分析,以了解被測標本中抗體或抗原含量。ELISA辦法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA試劑盒測定中影響要素較多,并且其操作中有必定的技能請求,在查驗中除正常反響外,有時??梢姷揭恍┻^錯成果(即假陽性或假陰性成果)。
血清是zui常用的ELISA標本,血漿通??梢暈榕c血清平等的標本,標本導致的假陽性和假陰性成果主要是攪擾性物質(zhì)所造成的,分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種:
1、內(nèi)源性物質(zhì)
有人以為大概40%的人血清標本中含有非特異性攪擾物質(zhì),能夠不一樣程度影響檢查成果。多見的攪擾物質(zhì)有:類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠 Ig (s)抗體、穿插反響物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
2、ELISA試劑盒外源性物質(zhì)
外源性物質(zhì)常常是因為用于ELISA測定的血標本的采集、儲存等不妥所造成的。如標本溶血、標本被細菌污染、標本儲存過久、標本凝聚不全和*中添加物等影響。
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