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閱讀:738發(fā)布時(shí)間:2017-6-21
ELISA試劑盒可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定辦法中有三個(gè)必要的試劑:
(1)固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);
(2)酶符號(hào)的抗原或抗體,稱為"物"(conjugate);
(3)酶反響的底物。依據(jù)試劑的來歷和標(biāo)本的狀況以及檢查的具體條件,可設(shè)計(jì)出各種不類型的檢查辦法。
ELISA試劑盒可依據(jù)抗原抗體的狀況來分類為以下兩種辦法。
直接法(direct ELISA)
將抗原直接固定在固相載體上,加入酶符號(hào)的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。
優(yōu)勢:操作手續(xù)簡短,因無須運(yùn)用二抗可防止交互反響。
缺陷:實(shí)驗(yàn)中的一抗都得用酶符號(hào),但不是每種抗體都適合做符號(hào),費(fèi)用相對進(jìn)步。
間接法(indirect ELISA)
ELISA試劑盒此測定辦法與直接法相似,不一樣在于一級抗體沒有酶符號(hào),改用酶符號(hào)的二級抗體去辨識(shí)一級抗體來測定抗原量。
優(yōu)勢:二抗可以加強(qiáng)信號(hào),而且有多種選擇能做不一樣的測定剖析。不加酶符號(hào)的一級抗體則能保留它zui多的免疫反響性。
缺陷:交互反響發(fā)作的機(jī)率較高。
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