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技術(shù)文章

血清標本越新鮮越好

閱讀:322發(fā)布時間:2017-5-4

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上海機純告訴科研小伙伴們血清標本越新鮮越好
1、制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只需待血清天然凝聚、縮短后即可取得。
2、如有細菌污染,菌體中或許富含內(nèi)源性HRP,也會發(fā)生假陽性反應(yīng)。
3、如在冰箱中保存過久,其間可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。
4、血清標本可按慣例方法搜集,應(yīng)留心避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為符號的ELISA測定中,溶血標本或許會添加非特異性顯色。
5、在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃,逾越一星期測定的需低溫冰存。
6、凍住血清融解后,蛋白質(zhì)有些濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛倒混和,不要在混勻器上激烈振蕩。
7、混濁或有堆積的血清標本應(yīng)先離心或過濾,弄清后再查看,自配的緩沖液運用pH計測量較正。
8、重復(fù)凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標本如需保存作屢次查看,宜少數(shù)分裝冰存。
9、ELISA頂用的蒸餾水或去離子水,包含用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。

 

可以說在ELSIA試劑盒操作中,洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù),因為聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,為達到分離游離的和結(jié)合的酶標記物的目的,清除殘留在板孔中游離的物質(zhì),以及非特異性地吸附的干擾物質(zhì),在洗滌時又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來,所以在洗板時會有一定誤差,人為因素很大,洗的不*或串了孔,對實驗結(jié)果將產(chǎn)生很大的影響,所以一定要小心。


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