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ELISA試劑盒運用抗原的純度

閱讀:137發(fā)布時間:2017-10-31

因為ELISA試劑盒酶聯(lián)免疫吸附技能現(xiàn)在在技能上缺乏標(biāo)準(zhǔn)化,盡管現(xiàn)在上以及我國有了部分標(biāo)準(zhǔn)血清或參比血清(血清盤)。因而,血標(biāo)本在收集處理時應(yīng)當(dāng)心,在冰箱中保存不易過久。在酶聯(lián)免疫測定尤其是直接ELISA試劑盒中,試劑的特異性取決于。標(biāo)本凝聚不全時,血清中會殘留部分纖維蛋白原,也易形成假陽性。檢修標(biāo)本中含有酶符號物的攪擾物,內(nèi)源性攪擾物類風(fēng)濕因子(RF)、黃疸等,類風(fēng)濕因子是可作用于多種動物以及人IgGFc段的自身抗體,多數(shù)為IgM類,能充當(dāng)抗原成分與固相及酶標(biāo)抗體反應(yīng),然后呈現(xiàn)非特異性顯色。
如有細(xì)菌污染,ELISA試劑盒菌體中可能含有內(nèi)源性HRP(辣根過氧化酶),有國內(nèi)報導(dǎo)酶免HBsAgELISA試劑盒測溶血標(biāo)本時可形成假陽性。ELISA試劑盒中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種,以微量滴定板zui為常見。外源性攪擾物,經(jīng)常因樣品收集、儲存、處理不妥形成如樣品溶血,被細(xì)菌污染,標(biāo)本凝聚不全等。
ELISA試劑盒如在冰箱中保存過久,其間的IgG可發(fā)作聚合,在直接法ELISA試劑盒中可使本底加深。但因為受方法學(xué)及技能條件的約束,在酶聯(lián)吸附測定中有時不可避免的會泛起必定的非特異性,但我們能夠經(jīng)過以上辦法把非特異性顯色降至zui低限底,然后前進(jìn)檢測的特異性,并得到更正確、牢靠的試驗成果。


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