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ELISA實驗常用規(guī)則和通用步驟是什么?

閱讀:240發(fā)布時間:2018-3-5

ELISA實驗常用的規(guī)則是什么?
ELISA是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術。它是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。以下是對ELISA實驗的通用步驟的簡單說明。
ELISA實驗通用步驟:
(1)、要保證移液槍的性,偏差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行判定。如果有專業(yè)人員進行糾正更好。
(2)、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。提取不一樣的液體后,要更換槍頭。即使是提取標準品時也一樣。
要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使效果更安穩(wěn)。 
(3)、實驗時,要使底物避光儲存。
(4)、用槍提取液體時速度不能太快,避免生成氣泡而使提取量不。
(5)、提取液體時,要用量程和需要量相近的槍去吸,減小偏差數(shù)值。
(6)、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
(7)、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕搖晃30秒,是液體緩和均勻。也可以用酶標儀的晃動功用。
(8)、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,避免水分的蒸發(fā)。
(9)、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
(10)、洗液不夠時,可用蒸餾水自行制作PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長時間保存。
(11)、底物是光敏感的,需要在臨用前現(xiàn)配。
(12)、檢測前,要翻開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
(13)、底物有一定的毒性,中止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
(14)、待檢樣品要澄清,否則會影響效果的性。
(15)、溫浴時間應遵循試劑盒規(guī)定。
(16)、應盡量做雙孔實驗,這樣才華保證數(shù)據(jù)的性。
(17)、對效果有疑問的樣品要用其它方法進行確證。


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