1.ELISA試劑盒將抗原抗體反應(yīng)固相化：即試驗中的包被環(huán)節(jié)，使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團可以無選擇性地吸附蛋白分子。Elisa試劑盒此物理性吸附不損壞蛋白分子結(jié)構(gòu)，Elisa試劑盒堅持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性；
2.封閉：固相吸附蛋白對錯特異性的，在包被目的免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相表面依然有吸附其它蛋白的才干，為了確?？乖贵w反應(yīng)的特異性，因而，包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉。通常以為牛血清白蛋白是zui為抱負的封閉劑，也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清代替。
3.抗原抗體反應(yīng)：ELISA試劑盒抗原或抗體在恰當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進行特異的抗原抗體反應(yīng)。
4.酶反應(yīng)：酶可以通過共價鍵與抗原或抗體銜接構(gòu)成聯(lián)絡(luò)物，當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時分，被查看靶政策中也聯(lián)絡(luò)了酶分子。
5.底物反應(yīng)：聯(lián)絡(luò)在抗原抗體中的酶分子，Elisa試劑盒可以促進底物發(fā)作顏色反應(yīng)，查看人員可以裸眼查詢，可以通過顏色來斷定是不是有免疫反應(yīng)的存在，通過顏色的深淺判別標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量，也可借用酶標(biāo)儀在恰當(dāng)?shù)牟ㄩL讀取吸光度值。
ELISA試劑盒的基本原理便是將抗原抗體固定到特定的載體上進行反應(yīng)，并通過酶催化底物發(fā)作化學(xué)改變將抗原抗體反應(yīng)通過顏色的方式顯現(xiàn)出來。
