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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

shēng huà shì jì 組蛋白H1（小牛胸腺） 容量： 5克

shēng huà shì jì 組蛋白A（小牛胸腺） 容量： 5克

shēng huà shì jì 組蛋白 容量： 25克

shēng huà shì jì 組胺二鹽 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 組胺 容量： 100克

shēng huà shì jì 總脂酶測試盒【脂蛋白脂酶(LPL) 容量： RT 1000支/包

shēng huà shì jì 總鐵結(jié)合力測試盒 容量： RT 96支/盒

shēng huà shì jì 總巰基測試盒 容量： 10支/把

shēng huà shì jì 總抗氧化能力測試盒 容量： RT 20個/包

shēng huà shì jì 總蛋白定量測試盒（考馬斯亮蘭法） 容量： RT 96支/盒

shēng huà shì jì 總*、直接*測試盒 容量： 1個

shēng huà shì jì 總氨基酸測試盒 容量： RT 個

shēng huà shì jì 棕櫚油酸甲酯 容量：

shēng huà shì jì 棕櫚油酸 容量： 1克

shēng huà shì jì 紫脲酸銨 容量： 5克

shēng huà shì jì 紫脲酸 容量： 20毫升

shēng huà shì jì 仔副菌生產(chǎn)培養(yǎng)基 容量： RT 支

shēng huà shì jì 轉(zhuǎn)移核糖核酸（酵母） 容量：

 CCP 人補體調(diào)節(jié)蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 C4 人補體蛋白4 規(guī)格： 48T/96T

 C3 人補體蛋白3 規(guī)格： 48T/96T

 C7 人補體7 規(guī)格： 48T/96T

 C3SP 人補體3裂解產(chǎn)物 規(guī)格： 48T/96T

 C1INH 人補體1抑制物抗體 規(guī)格： 48T/96T

 VN/CD51+CD61 人玻連蛋白/體外粘連蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 VIM 人波形蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 HCV-IgM 人丙型肝炎IgM 規(guī)格： 48T/96T

 HCV-IgG 人丙型肝炎IgG 規(guī)格： 48T/96T

BJ5183 感受態(tài)細胞 100ul*10 M2-PK 人丙酮酸激酶M2型同工酶 規(guī)格： 48

25克

注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。