液相色譜儀流動(dòng)相的要求有哪些?
液相色譜流動(dòng)相是液體,對(duì)組分有親合力,并參與固定相對(duì)組分的競(jìng)爭(zhēng),正確選擇流動(dòng)相溶劑直接影響樣品組分的分離。
一、溶劑對(duì)于待測(cè)樣品必須具有合適的極性和良好的選擇性。
二、溶劑與檢測(cè)器匹配:
對(duì)于紫外吸收檢測(cè)器,不能用對(duì)紫外光有吸收的溶劑。
對(duì)于示差折光檢測(cè)器,要求選擇與組分折光率有較大差別的溶劑作流動(dòng)相,以達(dá)到高靈敏度。
三、高純度:
由于液相色譜靈敏度高,對(duì)流動(dòng)相溶劑的純度要求高。不純的溶劑會(huì)引起基線不穩(wěn)或產(chǎn)生假峰。
四、化學(xué)穩(wěn)定性好。
五、粘度適中:
若溶劑粘度高,會(huì)增高壓力,不利于分離。常用的低粘度溶劑有丙酮、甲醇和乙腈等。
粘度過(guò)低的溶劑不宜采用,如戊烷等,它們?nèi)菀自谏V柱和檢測(cè)器內(nèi)形成氣泡,影響分離。
液相色譜儀的梯度洗脫是指在同一個(gè)色譜分析周期中,按一定程度不斷改變流動(dòng)相的濃度配比。梯度洗脫又稱梯度淋洗或程序洗脫。
一、梯度洗脫類型:
1、高壓梯度:采用兩臺(tái)高壓輸液泵,分別按設(shè)定的比例輸送A和B兩種溶液至混合器,混合器在泵之后,兩種溶液在高壓狀態(tài)下混合。
2、低壓梯度:只需一臺(tái)高壓輸液泵,比例閥在泵之前,溶液在常壓(低壓)下混合。
二、梯度洗脫實(shí)質(zhì):
通過(guò)不斷地變化流動(dòng)相的配比和極性來(lái)調(diào)整混合樣品中各組分的k值,使所有色譜帶都以平均k值通過(guò)液相色譜儀色譜柱。梯度洗脫在液相色譜儀中所起的作用相當(dāng)于氣相色譜儀中的程序升溫,所不同的是,在梯度洗脫中樣品k值的變化是通過(guò)流動(dòng)相的極性、PH值和離子強(qiáng)度改變來(lái)實(shí)現(xiàn)的,而不是通過(guò)改變溫度(溫度程序)來(lái)實(shí)現(xiàn)。
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