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人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒圖片

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產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn) 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒圖片質(zhì)量保證,專售科研試劑,*,期待您的來電,量大價(jià)優(yōu), 我司所有elisa試劑盒均可以提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),客戶自己提供代測(cè)樣本,七個(gè)工作日即可提供客戶所需原始數(shù)據(jù)。

人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒圖片的操作方法:

產(chǎn)品名稱:人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒圖片
英文名稱:Human Pyruvate Kinase,M2-PK ELISA Kit
貯藏條件:2-8低溫保存
有效期:6個(gè)月
特異性:可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測(cè)種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床

產(chǎn)品名稱

人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒圖片

英文名稱

Human Pyruvate Kinase,M2-PK ELISA Kit

分類

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒

人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒圖片樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2. 細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104 -106 /ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
4. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6. 組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
8. 保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒圖片操作步驟:
1、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50µl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,然后再加待測(cè)樣品10µl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
2、溫育:用封板膜封板后置 37溫育30分鐘。
3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復(fù)5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,空白孔除外。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A50µl,再加入顯色劑B50µl,輕輕震蕩混勻,37避光顯色
10 分鐘.
7
、終止:每孔加終止液50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
8、測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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