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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡檢測(cè)>> 活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒1000T售后服務(wù)
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更新時(shí)間:2017-07-03 13:28:28瀏覽次數(shù):209次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
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我司活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒1000T售后服務(wù)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購(gòu)模式!我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢!
活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒1000T售后服務(wù)保存條件: -20°C避光保存。避免反復(fù)凍融。
有效期:一年
活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒1000T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒1000T售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
兩面針Zanthoxylum nitidum Nelumol A none 77836-86-3 C21H30O4 ≥95%
竹紅菌速HypocrellinB13940-24-220mg
云南鼠尾草Salvia yunnanensis 2,3,24-Trixy7noxy-12-ursen-28-oic acid 2ALPHA,3ALPHA,24-三輕基烏蘇-12-烯-28-酸 89786-83-4 C30H48O5 *(5795
中藥對(duì)照藥材水翁花121207-0101TLC法鑒別
Anxy7noicaritin脫水羊藿素 純度:≥98%
(+)-兒茶速 (+)-Catechin Hydrate 分 子 量:308.2800 編號(hào):225937-10-0 分子式:C15H16O7 (+)-兒茶速--((+)-Catechin Hydrate)的詳細(xì)信息 操作與貯存:儲(chǔ)存溫度2-8°C
水飛薊 Silybum marianum(L.)Gaertn. Silychristin 水飛薊亭 33889-69-9 C25H22O10 花椒毒酚; 花椒毒醇(5711
含量測(cè)定*100223-200102常溫,避光50mg
Fosinopril wo7ium *標(biāo)準(zhǔn)品88889-14-9 200mg
催吐蘿芙木Rauvolfia vomitoria metxyl levulinate 乙酰丙酸甲酯 624-45-3 C6H10O3 ≥95%
6398-98-7 阿莫地喹鹽酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品 500mg
棕櫚油醋酯Palmiticacidmetxylester25mg/支
16-O-Acetylpolyporenic acid C 2535-06-0
Naproxen 普生標(biāo)準(zhǔn)品22204-53-1 200mg普生標(biāo)準(zhǔn)品
3,6-O-二??鼘幩?/span> HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
Lyso-PAF C-16-d4 (500 ug) 1-O-hexadecyl-(7,7,8,8-d4)-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; Lyso-Plaet-activating Factor C-16-d4; Lyso-PAF C-16-d4
UNC3230 (10 mg) 5-[(cyclohexylcarbonyl)amino]-2-(pxenylamino)-4-thiazolecarboxamide
RPE-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml RPE-streptavidin conjugate 1 mg/ml
CAY10679 (100 mg) 1,1’-(1,8-dioxo-1,8-octanediyl)bis[glycyl-glycine; N,N’-bis(glycyl-glycine)-hexane-1,6-Dicarboxyamide; CAY10679
Linoleic Acid (50 mg) 9Z,12Z-octadecadienoic acid; fairic Acid; Linoleic Acid
2-Acetylnaphtho[2,3-b]furan-4,9-dione; BBI608 Cancer Cell Stemness Inhibitor, BBI608
GLP-1 (1-37) (human, bovine, guinea pig, mouse, rat)His-Asp-Glu-Phe-Glu-Arg-His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly
WWamide-1Trp-Lys-Glu-Met-Ser-Val-Trp-NH2
[Leu144,Arg147]-Myelin Proteolipid Protein(139-151)Ser-His-Leu-Gly-Lys-Leu-Leu-Gly-Arg-Pro-Asp-Lys-Phe
Biotin-[Glu1]-Gastrin I (human) (phosphorylated)Biotin-Glu-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-pTyr-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2
OctaneuropeptideArg-Pro-Gly-Leu-Leu-Asp-Leu-Lys
活細(xì)胞/死細(xì)胞雙染試劑盒1000T售后服務(wù)正丁胺ButylamineCP250mL
CA1361-1g丙谷二肽39537-23-01g0
ER0701Bst1107 I500 units
質(zhì)粒中量提取試劑盒50T
典硝基四唑紫250mg
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