細胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測試劑盒100T使用說明書使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：細胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測試劑盒100T使用說明書
儲存條件：2-8℃避光保存。*保存-20℃避光保存。

有效期： 一年。

產(chǎn)品簡介：

細胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測試劑盒可用于細胞凋亡檢測，也可用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色，染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細胞儀檢測。本試劑盒細胞染料是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，對細胞的毒性較低。能少許進入正常細胞膜，使其染上低藍色，而凋亡細胞的膜通透性增強，因此進入凋亡細胞中的染料比正常細胞的多，熒光強度要比正常細胞中要高，此外，凋亡細胞的染色體DNA的結(jié)構(gòu)發(fā)生了改變從而使該染料能更有效地與DNA結(jié)合，并且凋亡細胞膜上的p-糖蛋白泵功能受到損傷不能有效地將染料排出到細胞外使之在細胞內(nèi)積累增加等都使凋亡細胞的藍色熒光增強。染料的大激發(fā)波長為346nm，大發(fā)射波長為460nm；染料和雙鏈DNA結(jié)合后，大激發(fā)波長為350nm，大發(fā)射波長為461nm。本染色試劑盒可直接用于活細胞或組織染色，也可用于固定細胞或組織染色。

細胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測試劑盒100T使用說明書操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測試劑盒100T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
狼牙刺Sophora viciifolia Neosophoramine 新槐胺 52932-74-8 C15H20N2O ≥98%

正丁基本酞Butylphthclidq6066-49-220mg

鹽膚木Rhus chinensis 3',4',7-Trimetxoxyflavan 3',4',7-*氧基黃烷 116384-26-0 C18H20O4 單元素鋱溶液成分分析標準物質(zhì)080569

檢查用枸椽酸*E-異構(gòu)體100316-200402常溫，避光30mg

鯡魚油標準品2ml
04-93-9 鹽酸*標準品 4vials

萊苞迪甙A;萊苞迪苷ALaibractrebaudiosideA;LaibractDiglycosideA28243-16-1HPLC≥98%,10mg/支

erythro-1-(4-xy7noxy- 3-metxoxypxenyl)propane-1,2-diol 1280602-81-4

右旋安非他命相關(guān)物質(zhì)A標準品625mg

甲氧醉椒素 500-62-0 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
白術(shù)內(nèi)酯I 73069-13-3 檢測用對照品 蒼術(shù)內(nèi)酯I

紫玉蘭Magnolia liliflora Maglifloenone 心夷烯同 82427-77-8 C22H26O6 變形鋁合金成分分析標準物質(zhì)(G02220

對照品次野鳶尾黃素111557-200101含量測定

Azaperone阿扎哌隆標準品1649-18-9200mg阿扎哌隆標準品

南美蟛蜞菊Wedelia trilobata Grandiflorenic acid 貝殼二烯酸 22338-67-6 C20H28O2 ≥95%
5（S）-HETrE （100 ug）     5S-xy7noxy-6E，8Z，11Z-eicosatrienoic acid； 5（S）-HETrE

（S）-Ketoprofen （1 g）     （S）-2-（3-benzoylpxenyl）Propionic Acid|Dexketoprofen； （S）-3-benzoyl-α-metxyl-benzeneacetic acid

mFluor Red 780-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     mFluor Red 780-streptavidin conjugate 1 mg/ml

α-Piperidinobutiopxenone （xy7nochloride） （10 mg）     1-pxenyl-2-（1-piperidinyl）-1-butenone， monoxy7nochloride； α-Piperidinobutiopxenone （xy7nochloride）

Docosatrienoic Acid （10 mg）     13Z，16Z，19Z-docosatrienoic acid； Docosatrienoic Acid

D-（     Ampicillin wo7ium
Glycogen Synthase-derived peptideLys-Lys-Leu-Asn-Arg-Thr-Leu-Ser-Val-Ala

α-Calcitonin Gene Related Peptide, humanAla-Cys-Asp-Thr-Ala-Thr-Cys-Val-Thr-His-Arg-Leu-Ala-Gly-Leu-Leu-Ser-Arg-Ser-Gly-Gly-Val-Val-Lys-Asn-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (Disulfide bridge Cys2-Cys7)

[Lys6] Leu-EnkephalinTyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Lys

Biotin-Gastrin (1-17)Biotin-Glu-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2

Osteostatin amide (human)Thr-Arg-Ser-Ala-Trp-Leu-Asp-Ser-Gly-Val-Thr-Gly-Ser-Gly-Leu-Glu-Gly-Asp-His-Leu-Ser-Asp-Thr-Ser-Thr-Thr-Ser-Leu-Glu-Leu-Asp-Ser-Arg-NH2
細胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測試劑盒100T使用說明書1,1,1-三錄乙烷1,1,1-TrichloroethaneCP500mL

CA1151-5g鹽酸吖啶黃8063-24-95g0

C0130-100mgCollagenaseⅠ 膠原酶Ⅰ9001-12-1100mg

Stool DNA Kit100T

L-(+)-Arabinose100g