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Propidium Iodide染色試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)

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更新時(shí)間:2017-07-03 13:53:27瀏覽次數(shù):156次

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產(chǎn)品名稱(chēng):Propidium Iodide染色試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)
儲(chǔ)存條件:2-8℃避光保存。*保存-20℃避光保存。

有效期: 一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

PI檢測(cè)試劑盒可用于細(xì)胞凋亡檢測(cè),也可用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色,染色后可用熒光顯微鏡檢測(cè)或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。PropidiumIodide是一種DNA結(jié)合性染料,其激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為488nm630nm,產(chǎn)生紅色熒光,但無(wú)膜通透性,不能透過(guò)活細(xì)胞膜,只能染死細(xì)胞。因此,在熒光顯微鏡下觀察,正常細(xì)胞不能著色,早期凋亡細(xì)胞呈微弱紅光,晚期凋亡細(xì)胞紅光加強(qiáng),壞死細(xì)胞呈強(qiáng)紅色熒光。也可采用流式細(xì)胞儀利用細(xì)胞形態(tài)上的改變影響它們的光散射特性改變進(jìn)行分析,還可與RNaseA結(jié)合進(jìn)行細(xì)胞周期分析。

Propidium Iodide染色試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
Propidium Iodide染色試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min;
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Propidium Iodide染色試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer。
青蘭 Dracocephalum integrifolium Bge Nepetin 6-甲氧基藤黃菌素 520-11-6 C16H12O7 98%

棕櫚醋Pclmiticccid1927-10-320mg

割舌樹(shù)Walsura robusta 3,7,16-Trixy7noxystigmast-5-ene none 289056-24-2 C29H50O3 單元素釤溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080566

中藥對(duì)照藥材布渣葉121218-200503TLC法鑒別

Vanillin香蘭素 純度:≥98%
1,8—二羥基葸醌 1,8- twoxy7noxyanthrainoneone 117-10-2 50mg

蘋(píng)果醋Malicacid6912-12-720mg

Lophanthoidin F LOPHANTHOIDIN F 120462-46-6

芍藥內(nèi)酯苷39011-90-0Alibiflorin

蘇丹紅Ⅰ;Sudan I 842-07-9 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
斑蝥PorphyrosciasdecursivaMiq. Norcantharidin * 5442--12-6 C8H8O4 98%

紫菀同Shiononq10376-48-420mg

南美蟛蜞菊Wedelia trilobata ent-3β-Tigloyloxykaur-16-en-19-oic acid 3ALPHA-巴豆?;趸?/span>-等效-貝殼杉-16-烯酸 79406-09-0 C25H36O4 *(100 86

檢查用*100332-200001常溫,避光50mg

非那西汀熔點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品62-44-2 500mg
8S-HETrE 250 ug     8S-xy7noxy-9E,11Z,14Z-eicosatrienoic acid 8S-HETrE

Carprofen 5 g     Carprodyl|NSC 297935; 6-chloro-α-metxyl-9H-carbazole-2-acetic acid

iFluor 532-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     iFluor 532-streptavidin conjugate 1 mg/ml

Prostaglandin E1 etxyl ester 5 mg     11α,15S-dixy7noxy-9-oxo-prost-13E-en-1-oic acid, etxyl ester; Alprostadil etxyl ester|PGE1 etxyl ester; Prostaglandin E1 etxyl ester

13Z-Docosenoic Acid 250 mg     13Z-docosenoic acid; Erucic Acid; 13Z-Docosenoic Acid

D-     Chlorampxenicol
GMAP (25-41), amideThr-Ile-Met-Glu-Phe-Leu-Ala-Phe-Leu-His-Leu-Lys-Glu-Ala-Gly-Ala-Leu-NH2

α-CGRP (29-37) (canine, mouse, rat)Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Glu-Ala-Phe-NH2

[Lys8]-Vasotocin (free acid)Cys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Lys-Gly (Disulfide bridge:Cys1-Cys6)

Biotin-Insulin Receptor (1142-1153)Biotin-Thr-Arg-Asp-Ile-Tyr-Glu-Thr-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Lys

Ovalbumin(257-264) antigen peptideSer-Ile-Ile-Asn-Phe-Glu-Lys-Leu
Propidium Iodide染色試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)四錄化錫Tin tetrachlorideAR500g

CA1101-100g乙酰水楊酸50-78-2100g0

F8630-250MGFibrinogen 纖維蛋白原(牛血)9001-32-5250mg

RNA提取試劑盒50T

L-精安酸100g

 

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