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更新時間:2017-07-03 14:18:10瀏覽次數(shù):325次
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細(xì)菌活性檢測試劑盒-CCK81000T實驗方法儲存條件: 2-8℃避光保存。
*不用分裝后-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融。
有效期: 一年。
產(chǎn)品簡介:
細(xì)菌活性檢測試劑盒 (CCK-8法) 是應(yīng)用新型的水溶性四唑鹽2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽快速高靈敏度檢測細(xì)菌活性的比色檢測產(chǎn)品。
本四唑鹽在電子載體存在的情況下能夠被細(xì)菌的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan,生成的Formazan量與細(xì)菌的活性成正比。細(xì)菌活性越強,則顏色越深;細(xì)菌活性越弱,則顏色越淺。
對于同樣的細(xì)菌,顏色的深淺和細(xì)菌活性呈線性關(guān)系。 CCK-8溶液可以直接加入到細(xì)菌樣品中,不需要預(yù)配各種成分,CCK-8溶液很穩(wěn)定,對細(xì)菌沒有毒性,可以長時間培養(yǎng)細(xì)菌。
細(xì)菌活性檢測試劑盒-CCK81000T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
細(xì)菌活性檢測試劑盒-CCK81000T實驗方法注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
薔薇紅景天 Rhodiola rosea L. Ro 洛塞琳 84954-93-8 C20H28O10 ≥98%
山茱萸新苷NqwglycosidqsfromCornusofficinclisHPLC≥98%,20mg/支
蠟樹精 Fraxinol 486-28-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材龍膽花(黃花龍膽)121483-200501TLC法鑒別
xy7noXYCITRIC ACID CALCIUM SALT, (-)- /(-) xy7noxycitric acid (Ca-salt) 2-羥基檸檬酸純度:>95%
147770-08-9 *雜質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 5mg
脫蘇安醇8奧曲肽DeSuemmoniealcohol8octreotide2mg/瓶
Orsellinic acid 2,4-二輕基-6-甲基本 480-64-8
*相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品7305-71-7 25mg*相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品
酸漿苦味素L 113146-74-0 HPLC≥95%;20mg 訂購|咨詢
191217-81-9 普拉克索標(biāo)準(zhǔn)品 15mg
原花青速B1ProcyanidinB1HPLC≥95%,5mg/支;
Olean-12-ene-3,11-diol 齊墩果-12-烯-3,11-二醇 5282-14-4
2甲4錄丙酸 標(biāo)準(zhǔn)品 號:7085-19-0 100MG
L-茶酸;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 3081-61-6 0.1g 訂購|咨詢
新生霉素100克
1066-35-9二甲基錄硅烷;錄二甲基硅烷Dimetxylchlorosilane; Dimetxylsilyl chloride; DMCS; DMSC;
NICKELCHLORIDE,HEXAHYDRATE錄化鎳,六水技術(shù)級250G7791-20-0RT
2,4-二-5-甲氧基... 2,4-Dichloro-5-methoxypyrimidine,97% 19646-07-2 1G 通用試劑
羊抗狗IgG (抗血清) Anti-Dog IgG antibody produced in goat Null 1ML 免疫血清
3-乙酰shēng huà shì jì容量:保存:-20℃50毫克
75-36-5乙酰錄 ≥99.0% (T)Acetyl chloride
M-H瓊脂平板shēng huà shì jì容量:1米
3-* 3-Iodophenol,98% 626-02-8 10G 通用試劑
酚AS-BI磷酸二鈉/酚磷酸鈉/7-溴-N-(2-甲氧基苯基)-3-(磷酸氧基)-2-二鈉鹽/Naphthol AS-BI phosphate disodium salt BR,99.5% 100毫克 國產(chǎn)/進口
細(xì)菌活性檢測試劑盒-CCK81000T實驗方法微量可調(diào)八道移液器P10 支 BioHit原裝
GinsenosideRf人參皂甙Rf5克色固
聚炳烯 Polypropylqnq 9003-07-0
乙二醛縮雙(鄰基酚)/乙二醛縮雙鄰羥苯胺/乙二醛雙(2-羥基苯胺)/鈣紅/GBHA CP 10克 國產(chǎn)/進口
二乙酰一肟/2,3-丁二酮一肟/聯(lián)乙酰一肟/雙乙酰一肟/甲基肟乙基甲酮/丁二酮單肟/2,3-丁二酮肟/2,3-丁烷二酮一肟/肟乙基甲酮/丁二酮一肟/二甲基乙二酰一肟/Diacetyl monoxime AR, 10克 國產(chǎn)/進口
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