我司細(xì)胞膜/胞漿/核膜蛋白分步提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨，為客戶提供輕松便捷，安全可靠的網(wǎng)上采購模式！我們將竭誠為您服務(wù),咨詢！
細(xì)胞膜/胞漿/核膜蛋白分步提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

細(xì)胞膜蛋白/胞漿蛋白/核膜蛋白提取試劑盒適用于從各種原代或傳代細(xì)胞和各種實(shí)體組織，如腦、脊髓、神經(jīng)結(jié)或纖維、脂肪、肝臟、消化道、腎臟、心臟、肌肉、血管、結(jié)締組織等哺乳動(dòng)物組織中分步提取細(xì)胞膜蛋白/胞漿蛋白/細(xì)胞核膜蛋白/核內(nèi)蛋白。提取過程簡(jiǎn)單方便，可在2 小時(shí)內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了。本試劑盒含有的*配方能夠溶解細(xì)胞膜包括細(xì)胞質(zhì)膜和核膜。提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。

細(xì)胞膜/胞漿/核膜蛋白分步提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對(duì)照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
細(xì)胞膜/胞漿/核膜蛋白分步提取試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
金粟蘭Chloranthus spicatus Sarcandrone A none 1190225-47-8 C33H30O8 ≥95%

異類葉升麻苷cctqosidqisomqr20mg/支

柴胡皂苷B2;柴胡皂甙B2 Saikosaponin B2 58316-41-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

UV法含量測(cè)定*100685-200401常溫，避光100mg

Budesonide布*標(biāo)準(zhǔn)品51333-22-3200mg
16485-10-2 泛醇消旋體標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

高良姜速;3,5,7-三羥基皇同Galangin;3,5,7-threexy7noxyflavone248-83-4HPLC≥98%,20mg/支

Prostephanaberrine PROSTEPHANABERRINE 105608-27-3

丙本磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào)：181274-15-7 100mg

長(zhǎng)春扶寧 162652-95-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
原人參二醇 Protopanaxdiol (≥98%,HPLC) 30636-90-9 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品

余甘子Phyllanthus emblica (2R)-2-(乙酰氧基)-N-[(1S,2S,3R)-2,3-雙(乙酰氧基)-1-[(乙酰氧基)甲基]十七烷基]二十四碳酰安 340702-68-3 C50H93NO9 ≥96% 扶錄西林 雜質(zhì)D

1-Deoxynojirimycin脫氧野尻霉素19130-96-21-脫氧野尻霉素5mg/支

Pravastatin wo7ium *標(biāo)準(zhǔn)品81131-70-6 50mg

角葉鞘柄木Toricellia angulata Cleomiscosin C 臭矢菜素C 84575-10-0 C21H20O9 ≥95%
大鼠血管生成素受體Tie1(ANG-R-Tie1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

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總巰基測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣

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