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更新時間:2017-07-04 14:24:10瀏覽次數(shù):121次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總蛋白提取試劑盒(無去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
蛋白酶抑制劑混合物1ml免費(fèi)代測儲存條件:-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
本蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括*蛋白酶、半*酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
此抑制劑混合物為100 倍濃縮DMSO 溶液,適用于從哺乳動物細(xì)胞、組織中提取蛋白,直接加入任何組織類型和細(xì)胞的裂解產(chǎn)物中,均能有效抑制蛋白酶的活性,更高效的提取目的蛋白。適用于Western Blot 和免疫共沉淀等。
蛋白酶抑制劑混合物1ml免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
蛋白酶抑制劑混合物1ml免費(fèi)代測注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
地膽草Elephantopus scaber Scabertopin 地膽草種內(nèi)酯 185213-52-9 C20H22O6 ≥95%
醋棗仁皂苷AJujubosidqc20mg/支
沙蟾毒精;沙蟾毒經(jīng) Arenobufagin 464-74-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材三棱121521-200501TLC法鑒別
DEGALACTOTIGONIN 去半乳糖替告皂甙純度:>95%
1675-02-1 紅霉速標(biāo)準(zhǔn)品 50mg
白頭翁皂苷E-3PulsatillaSaponinE-3HPLC≥98%,10mg/支;
Sweroside 獐牙菜苷 14215-86-2
GLYCALPYRAMIDE標(biāo)準(zhǔn)品 號: 200mg
百秋李醇;Patchouli alcoh 5986-55-0 20mg 訂購|咨詢
* Piperacillin 61477-96-1 100mg
柚皮速Ncringqnin480-41-1HPLC≥98%;20mg/vial
23S-輕基-11,15-二氧靈芝酸DM 23S-xy7noxy-3,7,11,15-tetraoxo-lanost-8,24E-diene-26-oic acid 1085273-49-9 HPLC≥98% 5mg/支
含量測定*130422-2007052-8℃,避光100mg
毛冬青皂苷甲;毛冬青皂甙甲 Ilexsaponin A1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
小鼠過氧化物酶體增殖物激活受體δ(PPARδ)ELISA試劑盒 ,英文名: PPARδ ELISA Kit
人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA檢測試劑盒HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21BELISAKit 96T/48T
大鼠糖原磷酸化酶(GP)免疫試劑盒 Rat glycogen phosphorylase,GP ELISA Kit
英文名稱RatAquaporin5ELISAKit大鼠水通道蛋白5(AQP5)規(guī)格:96T/48T
化妝品甘素(dulcin)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitAT2R-Ab人血管緊張素Ⅱ受體2抗體規(guī)格:48T/96T
小鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat intercellular adhesion molecule 2 (ICAM-2/CD102) ELISA Kit 大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒
Humanangiotensinogen,aGISAKit 人血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanComplement7,C7ELISA試劑盒人補(bǔ)體7(C7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織BMK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPulmonarysurfatcant-associatedproteinA,SP-AELISAKit人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蛋白酶抑制劑混合物1ml免費(fèi)代測人酪酸激酶2(Tyk-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人狼抗凝抗體(LAC/LA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人狂犬病抗體(RV-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
我司蛋白酶抑制劑混合物1ml免費(fèi)代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
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