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更新時(shí)間:2017-07-04 14:24:53瀏覽次數(shù):229次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書(shū)
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
雙縮脲蛋白定量試劑盒500T使用說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品名稱:蛋白酶抑制劑混合物(含EDTA)1ml售后服務(wù)
儲(chǔ)存條件:-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本蛋白酶抑制劑混合物包含7種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括*蛋白酶、半*酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶、金屬蛋白酶等。
此抑制劑混合物為100 倍濃縮DMSO 溶液,適用于從哺乳動(dòng)物細(xì)胞、組織中提取蛋白,直接加入任何組織類型和細(xì)胞的裂解產(chǎn)物中,均能有效抑制蛋白酶的活性,更高效的提取目的蛋白。
蛋白酶抑制劑混合物(含EDTA)1ml售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
蛋白酶抑制劑混合物(含EDTA)1ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
蛋白酶抑制劑混合物(含EDTA)1ml售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
廣金錢草Herba Desmodii Styracifolii Schaftoside 夏佛塔苷 51938-32-0 C26H28O14 ≥98%
連翹苷Phillyrin20mg/支
酯蟾毒配基;蟾力蘇 Resibufogenin 465-39-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
中藥對(duì)照藥材*121522-200501TLC法鑒別
BOSWELLIC ACID, a- 乳香酸純度:>95%
16846-24-5 Josamycin標(biāo)準(zhǔn)品 (150mg)(-20℃) 150mg
洋金花Datura me [2R-[2ALPHA(R*),5ALPHA(R*)]]-2-(1,2-二輕基-1-甲基乙基)-6,10-二甲基螺[4.5]癸-6-烯-8-同 62574-30-5 C15H24O3 ≥95% 半庫(kù)溴銨:用于系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(Y0000577
Aminobutanol安基丁醇標(biāo)準(zhǔn)品96-20-8500mg
萬(wàn)乃洛韋相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品15mg
貝母素甲 23496-41-5 HPLC≥98%;
* Ginseng stem andYe Zaogan 50mg
柚皮速Naringenin480-41-120mg
Rauvoyunine C 1211543-01-9
人參皂苷CK分子式: C36H62O8
L-絲酸;L-Serine 56-45-1 100mg 訂購(gòu)|咨詢
小鼠海藻糖酶(TREH)ELISA試劑盒 ,英文名: TREH ELISA Kit
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人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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