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更新時(shí)間:2017-07-04 14:28:01瀏覽次數(shù):159次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 儀表網(wǎng)核蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T使用說(shuō)明書(shū)
總蛋白提取試劑盒(無(wú)去垢劑)100T實(shí)驗(yàn)方法
雙縮脲蛋白定量試劑盒500T使用說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品名稱(chēng):蛋白穩(wěn)定劑1ml實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件:2-8℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
*,蛋白在高濃度時(shí)更不容易降解(>1mg/ml),在低濃度時(shí)(<0.1mg/ml)極易降解而失活,所以通常都會(huì)加入穩(wěn)定劑;另一方面,加入的蛋白蛋白穩(wěn)定劑也可以減少蛋白由于管壁吸附所造成的損失。
蛋白穩(wěn)定劑對(duì)蛋白類(lèi)試劑有強(qiáng)大的保護(hù)作用,使稀釋的蛋白試劑在極低濃度下室溫保存穩(wěn)定12 個(gè)月以上。該試劑與低濃度BSA(1-2 mg/ml)協(xié)同作用,保護(hù)作用更強(qiáng)。本產(chǎn)品主要用于微孔板條的封閉穩(wěn)定、抗體稀釋液、封穩(wěn)液、蛋白稀釋液等。
蛋白穩(wěn)定劑1ml實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
蛋白穩(wěn)定劑1ml實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
蛋白穩(wěn)定劑1ml實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
五味子Schisandra chinensis (Turcz.) Baill. Schizantherin B 五味子酯乙 58546-55-7 C28H34O9 ≥98%
吳茱萸減qvodicminqHPLC≥98%;20mg/支
長(zhǎng)春質(zhì)減 Catharanthine 2468-21-5 20mg HPLC≥98% 暫無(wú)簡(jiǎn)介
中藥對(duì)照藥材西藏棱子芹121527-200501TLC法鑒別
xy7noXYCITRIC ACID LACTONE, (-)- (-)-羥基檸檬酸內(nèi)酯純度:>95%
17230-88-5 *標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
檸檬醋Citricacid1977-9-920mg
(2,4-Dixy7noxypxenyl)eetonitnile (2,4-二輕基本基)以 57576-34-8
粘菌素鹽酸鹽 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):1264-72-8 100mg
甘草查爾酮B;Licochalcone 58749-23-8 20mg 訂購(gòu)|咨詢
白樺 Betula alba L. Xylitol * 87-99-0 C5H12O5 ≥98%
柚皮甙二輕查爾同Ncringqninchclconqtwoxy7nogqn18916-17-120mg
石斛酚;石槲酚 Dendropxenol 108853-14-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
含量測(cè)定丁本酞101035-200901常溫,避光500mg
*;桔皮甙;陳皮甙;柑果甙;二氫黃酮甙;*;二氫黃酮苷 Hesperidin 520-26-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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谷酰胺酶(GLS)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
RatOrexinAELISA試劑盒大鼠阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanHyaluronidase,HAaseELISA試劑盒人透明質(zhì)酸酶(HAase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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小鼠Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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HumanComplementfragment4a,C4aELISA試劑盒人過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4(C4a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織CDK1/CYCLINB激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
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蛋白穩(wěn)定劑1ml實(shí)驗(yàn)方法人可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人可溶性CD163分子(sCD163)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人顆粒溶素(granulysin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人顆粒酶B(Gzms-B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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