蛋白酶抑制劑混合物片劑（EDTA Free）20片免費代測使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產品名稱：蛋白酶抑制劑混合物片劑（EDTA Free）20片免費代測
儲存條件：2-8℃保存。

有效期：兩年。

產品簡介：

本蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括*蛋白酶、半*酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。此抑制劑混合物適用于從哺乳動物細胞、組織中提取蛋白，直接加入任何蛋白裂解液中，均能有效抑制蛋白酶的活性，更高效的提取目的蛋白。適用于WesternBlot和免疫共沉淀等。

蛋白酶抑制劑混合物片劑（EDTA Free）20片免費代測操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
蛋白酶抑制劑混合物片劑（EDTA Free）20片免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
香紫蘇 Salvia sclarea L. Sclareolide 香紫蘇內酯 564-20-5 C16H26O2 ≥98%

柴胡皂苷DScikoscponinDHPLC≥98%，20mg/支

朝藿定B;羊霍定B Epimedin B 110623-73-9 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

HPLC法含量測定*100698-200501常溫，避光100mg

Valproic Acid 丙戊酸標準品99-66-1 500mg
17560-51-9 Metolazone標準品 80mg

云南松Pinus yunnanensis 15,18-二輕基阿松香-8,11,13-三烯-7-同 213329-45-4 C20H28O3 ≥95% 肌酸靈酸鈉0 8601

*鹽酸鹽標準品134-80-5200mg

Tolazamide 妥拉磺脲標準品1156-19-0 200mg

柴胡皂苷C 20736-08-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
* 1124-11-4 檢測用對照品 2,3,5,6-*磷酸鹽

柚Citrus maxima Marmin 7-[[(2E,6R)-6,7-二輕基-3,7-二甲基-2-心烯-1-基]氧基]-2H-1-本并-2-同 14957-38-1 C19H24O5 蘆薈素016255

對照品苦杏仁苷110820-200403含量測定

Benzyl Benzoate本甲芐酯標準品120-51-45g本甲芐酯標準品

商陸Phytolacca esculenta van Houtte Esculentoside E 商陸皂苷E 65649-36-7 C35H54O11 ≥98%
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