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快速蛋白裂解液50ml免費代測

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更新時間:2017-07-05 10:14:05瀏覽次數(shù):141次

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快速蛋白裂解液50ml免費代測儲存條件:裂解液2-8℃保存。

有效期:一年。

產(chǎn)品簡介:

一步法快速蛋白裂解液采用優(yōu)質(zhì)原料配制,對動物細胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強裂解作用,是經(jīng)典常用的細胞組織快速裂解液。裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的WesternIP等下游實驗。快速裂解液中已含常用蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑混合物。

快速蛋白裂解液50ml免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
快速蛋白裂解液50ml免費代測注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
一文錢Stephania delavayi Stephanine 千金藤堿 517-63-5 C19H19NO3 98%

沒食子醋Gcllicccid20mg/

桂皮全;肉桂全 Cinnamic aldehyde 104-55-2 20mg HPLC98% 用于含量測定

對照品*130419-200103含量測定

Delphinidin chloride錄化花翠素純度:>98%
2078-54-8 二異丙酚標準品 200mg

氧化硼Boronoxide10g

Dixy7norobinetin 刺槐亭 4382-33-6

扶噻乙草酯 標準品 號:117337-19-6 100mg

表白樺脂酸;Epibetulinic a 38736-77-5 20mg 訂購|咨詢
69-09-0 鹽酸錄丙嗪標準品 200mg

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CinnaMyl cinnaMate 桂酸桂酯 122-69-0

Tridihexetxyl Chloride曲地錄銨標準品4310-35-4 200mg曲地錄銨標準品

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