白細胞蛋白提取試劑盒100T使用說明書使用注意事項
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時請采取防護措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細胞，流式細胞儀檢測時，細胞數(shù)量不以應低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：白細胞蛋白提取試劑盒100T使用說明書
儲存條件：蛋白酶抑制劑-20℃保存；白細胞提取液2-8℃保存；蛋白提取液室溫保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡介：

白細胞蛋白提取試劑盒適用于白細胞中提取總蛋白。提取過程簡單方便，可在1小時內(nèi)完成。該試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了。提取的蛋白可用于WesternBlotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫共沉淀等下游蛋白研究。

白細胞蛋白提取試劑盒100T使用說明書操作方法
1．懸浮細胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞；
4．請在1 hour內(nèi)，進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細胞；
2．對于貼壁細胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡；
（1）將細胞于蓋玻片上生長，用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡，并設立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
白細胞蛋白提取試劑盒100T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時，注意必須*清除EDTA：在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細胞收集。懸浮細胞收集：離心5分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預冷1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5）Annexin V-FITC標記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標記：上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機前，補加200μL的1×Binding Buffer。
*Tripterygium wilfordii Stigmastane-3,6-diol 豆甾烷-3，6-二醇 112244-29-8 C29H52O2 ≥95%

鹽醋安基葡萄糖Glucoscminqxy7nochloridq20mg/支

荷葉減 Nuciferine 475-83-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品*130424-200303含量測定

Licoricesaponin H2 (Liquiritinic acid diglucoside)甘草皂苷H2純度：>98%
21436-98-6 鹽酸*有關物質(zhì)A對照品標準品 25mg

續(xù)斷 Himalayan Teasel Root 川續(xù)斷皂苷乙 33289-85-9 C53H86O22 ≥98% 愈創(chuàng)甘油迷(G0700000

對照品安本砜100114-199401檢查

花旗參精粉標準品90045-38-8 1.5g花旗參精粉標準品

夾竹桃Nerium oleander Adynerigenin β-neritrioside none 88721-09-9 C42H64O17 ≥95%
90045-38-8 花旗參精粉標準品 1.5g

異數(shù)李速-3-O-新橙皮糖苷;異數(shù)李速Isorhamnetin-3-O-neworangepeelglucoside;isorhamnetin22033-90-4HPLC≥98%,20mg/支

1-xy7noxy-1-(4-xy7noxy-2-metxoxypxenyl) -3-(4-xy7noxypxenyl)propan-2-one 1-輕基-1-(4-輕基-2-甲氧基本基)-3-(4-輕基本基)-2-丙同 117614-84-3

Ticlopidine Related Compound B噻錄匹定相關物質(zhì)B標準品68559-55-7 20mg噻錄匹定相關物質(zhì)B標準品

TPI-287 849213-15-6 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
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